Struktur khusus mikroskop fluoresensi meliputi:
(1) Sistem filter warna
Blok filter warna adalah bagian penting dari mikroskop fluoresensi, dan komponen intinya terdiri dari filter penghalang pertama untuk cahaya eksitasi, filter penghalang kedua untuk cahaya emisi, dan cermin pemisah berkas. Model filter warna dan nama berbagai produsen seringkali tidak konsisten.
1. Filter cahaya eksitasi dan filter cahaya emisi: Berdasarkan karakteristik sumber cahaya dan pigmen fluoresen, tiga jenis pencocokan berikut biasanya dipilih untuk memberikan cahaya eksitasi dalam rentang panjang gelombang tertentu dan memungkinkan fluoresensi yang tereksitasi oleh sampel melewati dan mencapai lensa mata untuk pencitraan.
Eksitasi UV: Filter cahaya eksitasi dapat membiarkan sinar UV melewatinya dan menghalangi cahaya tampak di atas 400nm untuk melewatinya. Filter cahaya emisi yang sesuai memungkinkan cahaya biru melewatinya, dan cahaya di bidang pandang tampak biru, seperti saat diterapkan pada pewarnaan DAPI.
Eksitasi cahaya biru: Filter cahaya eksitasi dapat membiarkan cahaya biru melewatinya dan memblokir cahaya dari panjang gelombang lain. Filter cahaya emisi yang sesuai memungkinkan cahaya hijau melewatinya, seperti penanda pewarnaan GFP.
Eksitasi lampu hijau: Filter lampu eksitasi memungkinkan cahaya hijau melewatinya dan menghalangi cahaya dari panjang gelombang lain. Filter cahaya emisi yang sesuai biasanya memungkinkan cahaya merah melewatinya, seperti pewarnaan Rhodamin.
2. Filter warna semi transparan dan semi reflektif: Fungsinya untuk sepenuhnya memblokir cahaya eksitasi agar tidak melewati dan memantulkannya; Dan memancarkan cahaya dalam rentang panjang gelombang yang sesuai. Modelnya sesuai dengan filter cahaya eksitasi dan filter cahaya emisi.
(2) Lensa objektif dan lensa okuler
Berbagai lensa obyektif dapat digunakan, namun yang terbaik adalah memilih lensa dengan skala tambahan dan pengurangan aberasi kromatik, karena fluoresensi dirinya sangat rendah dan kinerja transmisi cahayanya (rentang panjang gelombang) cocok untuk fluoresensi. Karena kecerahan fluoresensi suatu gambar di bidang mikroskop berbanding lurus dengan kuadrat rasio bukaan lensa objektif dan berbanding terbalik dengan perbesarannya, untuk meningkatkan kecerahan gambar fluoresensi, lensa objektif dengan rasio bukaan yang lebih besar harus digunakan. Khusus untuk spesimen dengan fluoresensi yang tidak mencukupi, sebaiknya gunakan lensa objektif dengan rasio aperture tinggi dan transmisi cahaya tinggi, disertai dengan lensa okuler dengan perbesaran serendah mungkin.
(3) Perangkat optik lainnya
Lapisan reflektif cermin biasanya dilapisi dengan aluminium karena aluminium menyerap lebih sedikit sinar ultraviolet dan cahaya tampak di wilayah biru ungu, memantulkan lebih dari 90% (sementara perak memiliki reflektifitas hanya 70%). Umumnya cermin datar yang digunakan. Lensa pemfokusan, yang dirancang dan diproduksi khusus untuk mikroskop fluoresensi, terbuat dari kaca kuarsa atau kaca lain yang mentransmisikan sinar ultraviolet. Alat cahaya jatuh selain berfungsi sebagai sumber cahaya transmisif juga lebih cocok untuk pengamatan langsung terhadap spesimen buram dan semi transparan, seperti lembaran tebal, membran filter, koloni bakteri, kultur jaringan, dan sampel lainnya. Dalam beberapa tahun terakhir, banyak jenis mikroskop fluoresensi baru telah dikembangkan menggunakan perangkat cahaya jatuh, yang dikenal sebagai mikroskop fluoresensi cahaya jatuh.
