Spesifikasi sampel apa yang diperlukan untuk mikroskop cahaya?
Dalam proses penyiapan sampel mikroskop optik, ketebalan irisan sampel antara 2-25um; ketebalan irisan mikroskop elektron berada dalam 50-100nm (kecuali untuk mikroskop elektron tegangan tinggi, yang ketebalan sampelnya dapat mencapai 1um), sehingga metode irisan yang digunakan tidak semuanya sama.
Dalam hal pembawa, bagian pembawa mikroskop optik adalah slide kaca, sedangkan pembawa bagian mikroskop elektron adalah kisi-kisi.
Dalam hal fiksasi, irisan mikroskop optik difiksasi dengan fiksatif majemuk, sedangkan irisan mikroskop elektron difiksasi berulang kali dengan fiksatif tunggal.
Dalam hal pewarnaan, pewarnaan sampel optik relatif sederhana. Menurut sampel pengamatan yang berbeda dan jenis mikroskop optik, biasanya cukup untuk pewarnaan dengan beberapa zat pewarna tetap. Ada banyak metode yang rumit untuk pewarnaan ulang sampel mikroskop elektron, seperti pewarnaan negatif, pewarnaan perak dan sebagainya.
Dalam hal embedding, parafin, collodion, gelatin, dll digunakan sebagai agen embedding untuk bagian mikroskop optik; resin epoksi, resin polistiren, resin isobutilena, dan resin yang larut dalam air digunakan sebagai bahan penyemat untuk bagian mikroskop elektron.
Untuk memastikan bahwa bidang pandang mikroskop dapat disinari secara merata dan penuh, sistem optik iluminasi harus disesuaikan saat pertama kali memasang dan men-debug mikroskop. Ini adalah cara penting dan cara paling dasar untuk menggunakan mikroskop dengan benar dan mendapatkan hasil yang benar dan dapat diandalkan. persyaratan. Selain itu, menguasai penyesuaian sistem jalur optik iluminasi dengan benar merupakan langkah yang diperlukan setelah mengganti bohlam sumber cahaya selama penggunaan mikroskop, dan ini juga merupakan sarana yang diperlukan untuk memeriksa kinerja mikroskop dari waktu ke waktu setiap hari. menggunakan. Penyesuaian sistem jalur optik penerangan mikroskop terutama mencakup empat item berikut: 1. Penyesuaian awal ruang lampu sumber cahaya di luar mikroskop ① Buka cangkang ruang lampu terlebih dahulu, tekan klip pegas untuk memasukkan bohlam halogen ke dalam soket, dan hindari kontak langsung dengan bohlam dengan jari Anda selama pemasangan (dapat dipisahkan dengan kain lembut atau kertas) untuk menghindari Ada sidik jari dan kotoran lain pada bohlam, yang akan mempengaruhi masa pakai bohlam. ②Letakkan rumah lampu di atas meja, setelah menyalakan daya, gunakan obeng khusus untuk menyesuaikan lubang kenop fokus lampu (ditandai dengan "←→"), sehingga filamen diproyeksikan ke dinding 1-2 m jauhnya, dan gambar filamen disesuaikan. Kemudian sesuaikan ketinggian lampu dan sesuaikan lubang benang (ditandai dengan "──") agar posisi filamen sesuai; kemudian sesuaikan posisi kiri dan kanan lampu untuk menyesuaikan lubang sekrup (ditandai dengan "──") agar posisi filamen kiri dan kanan sesuai.
2. Pemeriksaan dan koreksi posisi sumber cahaya (filamen) pada mikroskop bertujuan untuk mengatur bayangan ujung iluminan secara tepat ke bidang pandang lensa objektif, dan memastikan bahwa bidang pandang mikroskop sepenuhnya dan seragam diterangi dari perspektif sumber cahaya. Pencahayaan, yang merupakan prasyarat untuk menyesuaikan sistem pencahayaan Kuhler. Alat dasar yang dibutuhkan: Teleskop pemusatan dilengkapi saat mikroskop dibeli. ① Cabut selongsong kaca buram di rumah lampu, dan pasang kembali rumah lampu ke mikroskop. ② Pilih lensa objektif 10x, nyalakan program sumber cahaya untuk menemukan sampel dan fokuskan dengan jelas, lalu gunakan lensa objektif 40x untuk memfokuskan sampel dengan jelas (lensa objektif 40x Anda dapat melihat seluruh gambar filamen ); ③ Buka diafragma bukaan dan diafragma bidang kondensor secara maksimal; ④ Cabut salah satu lensa mata, ganti dengan teleskop tengah, pegang bagian putih, regangkan lensa mata hitam dengan tangan lainnya, Anda dapat melihat gambar filamen di bidang penglihatan; ⑤ Jika posisi filamen tidak sesuai, sesuaikan lubang "──" untuk menyesuaikan gambar filamen ke arah horizontal, dan sesuaikan lubang "──" untuk menyesuaikan gambar filamen ke arah vertikal hingga Sesuaikan gambar filamen ke gambar lingkaran cahaya yang hanya mengisi bukaan lensa objektif; ⑥ Setelah penyetelan, masukkan selongsong kaca buram kembali ke posisi semula, cabut teleskop tengah, dan ganti lensa mata untuk penyetelan berikutnya. Penyesuaian ruang lampu sumber cahaya iluminasi yang disebutkan di atas di luar mikroskop dan verifikasi posisi benda bercahaya sumber cahaya di dalam mikroskop hanya perlu dilakukan ketika mikroskop pertama kali dipasang dan di-debug dan ketika bola lampu diganti , dan mikroskop tidak dapat disesuaikan secara acak saat menggunakan mikroskop. Jika terjadi kebingungan, dapat disesuaikan kembali ke keadaan semula sesuai dengan langkah-langkah di atas.
3. Penyesuaian sistem penerangan Kohler yang benar Salah satu tugas utama penyesuaian mikroskop yang benar adalah penyesuaian sistem jalur optik penerangan, dan kuncinya adalah penyesuaian sistem penerangan Kohler. Bagi setiap orang yang menggunakan mikroskop, khususnya mereka yang melakukan fotomikrograf, harus memiliki pemahaman dan penguasaan tertentu tentang prinsip sistem penerangan Kuhler dan langkah-langkah penyesuaiannya agar dapat sepenuhnya memainkan fungsi mikroskop dan mengambil gambar. Foto yang keluar pun bisa lebih konsisten dan sempurna efeknya. Prinsip sistem iluminasi Kohler adalah sederhana: cahaya yang dipancarkan oleh setiap titik pada sumber cahaya iluminan dapat menerangi bidang pandang mikroskop, dan cahaya yang dipancarkan oleh setiap titik pada sumber cahaya iluminan dikumpulkan, dan di lapangan. pandangan mikroskop Penerangan yang sangat penuh dan seragam tercapai. Tujuan penyesuaian sistem pencahayaan Kuhler adalah untuk mendapatkan pencahayaan yang seragam dan cukup untuk bidang pandang yang diamati, dan untuk mencegah cahaya liar mempengaruhi atau mengganggu sistem pencitraan, sehingga menghindari pengabutan pada film selama fotografi. Komponen yang diperlukan untuk sistem pencahayaan Kohler penyesuaian tinggi: diafragma bidang, sistem lensa kondensor yang dapat disesuaikan pada sumbu. ① Pilih 10× lensa objektif dan lensa okuler 10× ② Pasang lensa depan kondensor ke jalur optik, sesuaikan diafragma apertur ke posisi sedang (tidak terlalu besar atau kecil), lalu naikkan kondensor ke posisi atas, dan sesuaikan meja putar kondensor ke posisi Bright field "J" ③ Sesuaikan diafragma medan ke minimum (0,1)
④ Letakkan sampel biologis tersegel di atas panggung, nyalakan sumber cahaya, dan fokuskan dengan jelas
⑤ Akan ada area yang diterangi sebagian atau titik terang di bidang pandang, yang merupakan gambar kabur dari diafragma bidang, di mana detail sampel dapat terlihat dengan jelas; di luarnya ada bidang pandang yang lebih gelap, yang mungkin belum tentu Lihat detail sampel dengan jelas
⑥Sedikit sesuaikan kondensor ke bawah, sehingga titik terang di bidang pandang secara bertahap menyusut, dan secara bertahap menjadi gambar poligonal yang jelas, yang merupakan gambar yang jelas dari diafragma bidang;
⑦Umumnya, gambar poligonal tidak berada di tengah bidang pandang, dan perlu menyesuaikan sepasang sekrup tengah kondensor untuk menyesuaikan gambar poligonal diafragma lapangan ke posisi tengah;
⑧Secara bertahap buka diafragma bidang pandang untuk menjadikan gambar poligon sebagai poligon tertulis bidang pandang, dan selanjutnya periksa status perataan. Jika penjajaran tidak ideal, lanjutkan menyempurnakan sekrup penjajaran;
⑨Buka sedikit diafragma bidang pandang, sehingga gambar poligonalnya menghilang begitu saja di tepi bidang pandang. Sejauh ini, penyesuaian sistem penerangan Kohler telah selesai. Setelah sistem pencahayaan Kohler disesuaikan, seluruh bidang pandang diterangi secara merata, dan mikrograf yang diambil terang dan jernih dengan kontras normal.
