Ada dua jenis mikroskop fluoresensi berdasarkan jalur cahayanya.
1. Mikroskop fluoresensi transmisi: Sumber cahaya eksitasi melewati bahan spesimen melalui kondensor untuk merangsang fluoresensi. Kolektor medan gelap biasanya digunakan, atau kolektor biasa dapat digunakan, dan reflektor disesuaikan untuk mengalihkan dan memancarkan cahaya eksitasi ke samping ke spesimen. Ini adalah mikroskop fluoresensi yang lebih tua. Keuntungannya adalah fluoresensi kuat pada perbesaran rendah, tetapi kerugiannya adalah fluoresensi melemah seiring dengan peningkatan pembesaran. Oleh karena itu, lebih baik mengamati material spesimen yang lebih besar.
2. Mikroskop epi-fluoresensi adalah jenis mikroskop fluoresensi baru yang dikembangkan di zaman modern. Perbedaannya dengan di atas adalah cahaya eksitasi jatuh ke bawah dari lensa objektif ke permukaan spesimen, yaitu lensa objektif yang sama digunakan sebagai kondensor iluminasi dan lensa objektif untuk mengumpulkan fluoresensi. Pemecah sinar dua warna perlu ditambahkan ke jalur optik, yaitu 45% dengan uranium optik. Sudut, cahaya eksitasi dipantulkan ke lensa objektif dan terkonsentrasi pada sampel. Fluoresensi yang dihasilkan oleh sampel dan cahaya eksitasi yang dipantulkan oleh permukaan lensa objektif dan permukaan kaca penutup memasuki lensa objektif pada saat yang sama dan kembali ke pembagi sinar dikromatik, sehingga cahaya eksitasi Terpisah dari fluoresensi, sisa eksitasi cahaya kemudian diserap oleh filter pemblokiran. Jika Anda menggunakan sisipan kombinasi filter eksitasi/pemisah berkas dua warna/filter pemblokiran yang berbeda, Anda dapat memenuhi kebutuhan produk reaksi fluoresensi yang berbeda. Keuntungan dari mikroskop fluoresensi jenis ini adalah bidang pandangnya diterangi secara seragam, gambarnya jelas, dan semakin besar perbesarannya, semakin kuat fluoresensinya.
(2) Cara menggunakan mikroskop fluoresensi.
1. Nyalakan sumber cahaya, dan lampu merkuri bertekanan sangat tinggi perlu dipanaskan selama beberapa menit untuk mencapai titik paling terang.
2. Mikroskop fluoresensi transmisi memerlukan filter eksitasi yang diperlukan untuk dipasang di antara sumber cahaya dan kondensor, dan filter pemblokiran yang sesuai harus dipasang di belakang lensa objektif. Mikroskop epi-fluoresensi perlu memasukkan filter eksitasi/pemisah berkas dua warna/filter pemblokiran yang diperlukan ke dalam slot jalur cahaya.
3. Gunakan mikroskop perbesaran rendah untuk mengamati, dan sesuaikan pusat sumber cahaya sesuai dengan perangkat penyesuaian berbagai model mikroskop fluoresensi sehingga terletak di tengah seluruh titik iluminasi.
4. Tempatkan potongan spesimen dan sesuaikan fokus pengamatan. Harap diperhatikan saat digunakan: Jangan mengamati filter secara langsung dengan mata Anda untuk menghindari kerusakan mata; saat mengamati spesimen dengan lensa minyak, Anda harus menggunakan lensa minyak khusus non-fluoresen; lampu merkuri bertekanan tinggi tidak dapat langsung dibuka kembali setelah dimatikan. Ini dapat dimulai lagi setelah 5 menit, jika tidak maka akan menjadi tidak stabil dan mempengaruhi umur lampu merkuri.
(3) Amati di bawah mikroskop fluoresensi di platform pengajaran menggunakan filter cahaya biru-ungu. Dapat dilihat bahwa bagian tersebut adalah o. Dalam sel yang diwarnai dengan pewarna fluoresen oranye acridine 01%, nukleus dan sitoplasma tereksitasi untuk menghasilkan dua warna fluoresensi yang berbeda (hijau tua dan oranye-merah).
