Daya pisah mikroskop ditentukan oleh berbagai kondisi sistem optik
1, bukaan numerik, juga dikenal sebagai laju mulut cermin (atau laju pembukaan), disingkat NA, pada lensa objektif dan konsentrator diberi label dengan bukaan numeriknya, bukaan numerik adalah parameter utama lensa objektif dan konsentrator, tetapi juga merupakan indikator penting untuk menentukan kinerjanya. Bukaan numerik dan kinerja mikroskop mempunyai hubungan erat dengan daya pisah mikroskop berbanding lurus dengan kedalaman fokus berbanding terbalik dengan akar kuadrat kecerahan cermin berbanding lurus. Bukaan numerik dapat dinyatakan dengan rumus berikut: NA=n.sin 2 dimana: n - lensa objektif dan spesimen antara laju presipitasi media - lensa objektif sudut mulut cermin Yang disebut cermin sudut mulut adalah sumbu optik dari lensa objektif benda titik cahaya yang dipancarkan lensa objektif dan lensa objektif di depan lensa diameter efektif tepi sudut lembaran, lihat Gambar {{6 }}. Sudut mulut cermin selalu kurang dari 18{{10}} derajat . Karena indeks bias udara adalah 1, maka bukaan numerik lensa objektif kering selalu kurang dari 1, umumnya 0.05-0.95; lensa obyektif yang direndam dalam minyak, seperti minyak cedar (indeks bias 1,515) yang direndam, bukaan numeriknya bisa mendekati 1,5 Meskipun batas teoritis bukaan numerik sama dengan indeks bias media rendam yang digunakan, namun dalam praktiknya dari perspektif teknologi pembuatan lensa, tidak mungkin mencapai batas ini. Dalam praktiknya, batas ini tidak mungkin dicapai dengan teknologi pembuatan lensa. Secara umum, bukaan numerik besar lensa imersi minyak adalah 1,4 dalam batas praktis. Indeks bias berbagai media adalah sebagai berikut: 1,0 untuk udara, 1,33 untuk air, 1,5 untuk kaca, 1,47 untuk gliserin, dan 1,52 untuk minyak cedar.
2, daya pisah D dapat dinyatakan dengan rumus berikut: D=λ/2N.A. Panjang gelombang cahaya tampak adalah 0.4-0,7 mikron, panjang gelombang rata-rata adalah 0,55 mikron. Jika bukaan numerik objektifnya adalah 0,65, D {{10}},55 mikron / 2 × 0.65=0,42 mikron. Artinya, spesimen dapat diamati jika berukuran lebih besar dari 0,42 mikron, namun tidak dapat dilihat jika lebih kecil dari 0,42 mikron. Jika digunakan lensa objektif dengan bukaan numerik 1,25, D=2,20 mikron. Jika panjang benda yang diamati lebih besar dari nilai tersebut maka dapat dilihat. Terlihat semakin kecil nilai D maka resolusinya semakin tinggi dan semakin jelas objeknya. Berdasarkan rumus di atas, Anda dapat: (1) memperkecil panjang gelombang; (2) meningkatkan indeks bias; (3) meningkatkan sudut cermin untuk meningkatkan resolusi. Sinar ultraviolet sebagai sumber cahaya pada mikroskop dan mikroskop elektron adalah pemanfaatan gelombang cahaya pendek untuk meningkatkan resolusi melihat objek yang lebih kecil. Daya pisah lensa objektif berkaitan erat dengan kejernihan gambar. Lensa mata tidak memiliki kekuatan ini. Lensa okuler hanya memperbesar bayangan yang dihasilkan lensa objektif.
3, pembesaran: mikroskop memperbesar objek, pertama melalui lensa objektif * pembesaran kedua gambar, lensa mata dalam jarak penglihatan yang jelas disebabkan oleh pembesaran kedua gambar. Perbesaran adalah perbandingan ukuran bayangan dengan ukuran benda aslinya. Jadi perbesaran mikroskop (V) sama dengan perbesaran lensa objektif (V1) dan perbesaran lensa okuler (V2) hasil kali, yaitu: V=V1 × V2 Perbandingan cara perhitungannya, dapat diperoleh dari rumus berikut M=△ × D F1 F2 F1=Panjang fokus lensa objektif, F2=Panjang fokus lensa okuler △=Panjang tabung optik , D=jarak pandang (= 250 mm) △=perbesaran lensa objektif, D=perbesaran lensa okuler M=perbesaran mikroskop F1 F2 Tetapkan △=160 mm F1=4 mm D=250 mm F2=150 mm, lalu M=△ × D=160 × {{25} } × 16. 7=668 kali F1 F2 4 15
4, Kedalaman Fokus: Saat mengamati suatu spesimen di bawah mikroskop, objek terlihat jelas jika fokusnya berada pada bidang bayangan tertentu, yaitu bidang sasaran. Pada bidang pandang, selain bidang sasaran, Anda juga dapat melihat objek buram di atas dan di bawah bidang sasaran, dan jarak antara kedua permukaan tersebut disebut kedalaman fokus. Kedalaman bidang lensa objektif serta bukaan dan perbesaran numerik berbanding terbalik, yaitu semakin besar bukaan dan perbesaran numerik, semakin kecil kedalaman bidang. Oleh karena itu, penyetelan cermin oli lebih berhati-hati dibandingkan penyetelan cermin perbesaran rendah, jika tidak maka akan mudah membuat benda lolos dan tidak dapat ditemukan.
