Beberapa Parameter Teknis Mikroskop Optik
Bukaan numerik, disingkat NA, adalah parameter teknis utama untuk lensa objektif dan kondensor. Ini berfungsi sebagai indikator penting untuk mengevaluasi kinerjanya, terutama untuk lensa objektif. Nilainya masing-masing ditandai pada wadah luar lensa objektif dan kondensor.
Bukaan numerik (NA) didefinisikan sebagai hasil kali indeks bias (n) medium antara lensa depan objektif dan spesimen, dan sinus setengah sudut bukaan (u). Hal ini dinyatakan dengan rumus: NA=n*sin(u/2)
Sudut bukaan, disebut juga bukaan sudut, adalah sudut yang terbentuk antara titik benda pada sumbu optik lensa objektif dan diameter efektif lensa depan objektif. Sudut aperture yang lebih besar memungkinkan lebih banyak cahaya masuk ke objektif. Besarnya sebanding dengan diameter efektif lensa objektif dan berbanding terbalik dengan panjang fokus.
2. Resolusi
Resolusi mikroskop mengacu pada jarak minimum antara dua titik objek yang dapat dibedakan dengan jelas oleh mikroskop, disebut juga daya pisah. Rumus perhitungannya adalah: σ=λ / NA
dimana σ adalah jarak minimum yang dapat diselesaikan; λ adalah panjang gelombang cahaya; NA adalah bukaan numerik lensa objektif. Terlihat bahwa resolusi mikroskop ditentukan oleh NA objektif dan panjang gelombang cahaya iluminasi. Semakin besar NA dan semakin pendek panjang gelombang iluminasi, semakin kecil nilai σ, dan semakin tinggi resolusinya.
3. Pembesaran dan Pembesaran Berguna
Karena perbesaran dicapai dua kali oleh lensa objektif dan lensa okuler, perbesaran total Γ mikroskop adalah hasil kali perbesaran objektif dan perbesaran lensa okuler Γ₁: Γ=*Γ₁
Jelasnya, dibandingkan dengan kaca pembesar, mikroskop dapat mencapai perbesaran yang jauh lebih tinggi. Pembesaran dapat dengan mudah disesuaikan dengan mengganti lensa objektif dan lensa okuler dengan perbesaran berbeda.
Perbesaran juga merupakan parameter penting pada mikroskop, namun perbesaran yang lebih tinggi tidak selalu lebih baik. Batas perbesaran mikroskop didefinisikan sebagai perbesaran berguna.
4. Kedalaman Fokus
Kedalaman fokus adalah singkatan dari kedalaman fokus. Ketika memfokuskan suatu benda dengan mikroskop, tidak hanya titik-titik pada bidang fokus yang dapat terlihat dengan jelas, tetapi rentang ketebalan tertentu di atas dan di bawah bidang tersebut juga tetap tajam. Ketebalan zona bening ini adalah kedalaman fokus. Kedalaman fokus yang besar memungkinkan pengamatan seluruh lapisan spesimen, sedangkan kedalaman fokus yang kecil hanya memungkinkan pengamatan pada irisan tipis spesimen. Kedalaman fokus mempunyai hubungan berikut dengan parameter lainnya: (1) Kedalaman fokus berbanding terbalik dengan perbesaran total dan bukaan numerik lensa objektif. (2) Kedalaman fokus yang lebih besar berarti resolusi yang lebih rendah.
Objektif dengan perbesaran rendah umumnya memiliki kedalaman fokus yang besar, sehingga menyulitkan fotomikrografi. Hal ini akan dijelaskan secara rinci pada bagian fotomikrografi.
