Pro dan kontra dari mikroskop pemindaian laser multifoton
Mikroskop Pemindaian Laser Multi-Foton adalah metode eksperimental berdasarkan teknologi mikroskop pemindaian laser, yang memberikan lebih banyak **kemampuan pemotongan optik dalam observasi 3D. Metode eksitasi fluoresensi multifoton menggunakan cahaya merah atau inframerah dekat dengan panjang gelombang panjang untuk memperoleh gambar fluoresen resolusi tinggi dari spesimen dengan pembunuhan minimal terhadap spesimen aktif, sehingga cocok untuk pencitraan sel hidup, terutama jaringan hidup yang tebal seperti irisan otak, embrio, seluruh organ dan bahkan seluruh organisme.
Keuntungannya adalah sebagai berikut:
1, penggunaan lampu merah atau eksitasi cahaya inframerah, hamburan cahaya kecil(hamburan darikecilpartikel dan panjang gelombang pangkat empat dari perbandingan terbalik).
2, tidak memerlukan lubang jarum, dapat mengumpulkan lebih banyak foton yang tersebar dari penampang pencitraan.
3, lubang jarum tidak dapat membedakan antara foton tersebar yang dipancarkan oleh wilayah di luar fokus atau area fokus, multi-foton dalam rasio signal-to-noise pencitraan dalam baik.
4, eksitasi foton tunggal dari sinar ultraviolet atau cahaya tampak yang digunakan dalam berkas untuk mencapai bidang fokus sebelum sampel mudah diserap dan dilemahkan, tidak mudah untuk eksitasi yang dalam.
5, dalam pengamatan mikroskop biologis, * pertimbangan pertama adalah tidak merusak keadaan aktif organisme itu sendiri, untuk menjaga sirkulasi air, konsentrasi ion, oksigen dan nutrisi. Dalam pengamatan cahaya, energi panas dan foton harus tetap berada di dalam sel tanpa merusak jumlah iradiasi, energi cahaya.
6, mikroskop multi-foton juga memiliki banyak keunggulan. Seperti resolusi tiga dimensi, intrusi kedalaman, efisiensi hamburan, cahaya latar, rasio signal-to-noise, kontrol, dll., ada mikroskop laser sebelumnya yang tidak memiliki atau memiliki karakteristik luar biasa.
Mikroskop pemindaian laser confocal multi-foton telah diperluas ke berbagai bidang penelitian dan aplikasi. Ia mampu melakukan observasi tiga dimensi non-destruktif terhadap sampel dalam keadaan aslinya, dan dapat meningkatkan resolusi dan rasio signal-to-noise sistem. Dengan menggunakan perubahan sifat material setelah eksitasi multi-foton, penyimpanan data ketinggian tiga dimensi dan fabrikasi mikro tiga dimensi ke segala arah juga dapat dicapai, yang memiliki nilai aplikasi tinggi. Dapat diyakini bahwa dengan perkembangan lebih lanjut dari mesin, bahan, teknologi laser dan teknologi lain yang terkait dengan mikroskop confocal multiphoton, mikroskop pemindaian laser confocal multiphoton akan menjadi pengembangan yang lebih besar dan penerapan yang lebih luas.
Kekurangannya adalah sebagai berikut:
1, hanya pencitraan fluoresensi.
2, jika sampel mengandung kromofor yang dapat menyerap cahaya eksitasi, sepertipigmen, contohmungkin rusak secara termal.
3, resolusinya sedikit berkurang, meskipunini dapat ditingkatkan dengan penggunaan aperture confocal secara bersamaan, Tetapiakan ada kehilangan sinyal.
4. Biaya mikroskop pemindaian multifoton tinggi karena keterbatasan laser ultracepat yang mahal.
