Prinsip, Karakteristik, dan Kegunaan Mikroskop Fluoresensi
Prinsip dan karakteristik struktural mikroskop fluoresensi: Mikroskop fluoresensi menggunakan sumber cahaya titik yang sangat efisien untuk memancarkan panjang gelombang cahaya tertentu (seperti sinar ultraviolet 3650 atau cahaya biru ungu 4200) melalui sistem filter warna sebagai cahaya eksitasi, yang merangsang zat fluoresen dalam spesimen untuk memancarkan berbagai warna fluoresensi, dan kemudian mengamati melalui perbesaran lensa objektif dan lensa mata. Dengan cara ini, bahkan dengan fluoresensi lemah di latar belakang yang kuat, ia mudah dikenali dan memiliki sensitivitas tinggi. Hal ini terutama digunakan untuk mempelajari struktur sel, fungsi, dan komposisi kimia. Struktur dasar mikroskop fluoresensi terdiri dari mikroskop optik biasa dan beberapa aksesoris seperti sumber cahaya neon, filter eksitasi, pembagi berkas warna ganda, dan filter pemblokiran. Sumber cahaya fluoresen - biasanya menggunakan lampu merkuri bertekanan ultra tinggi (50-200W), yang dapat memancarkan cahaya dengan berbagai panjang gelombang, namun setiap zat fluoresen memiliki panjang gelombang cahaya eksitasi yang menghasilkan fluoresensi terkuat. Oleh karena itu, filter eksitasi (biasanya filter eksitasi ultraviolet, ungu, biru, dan hijau) perlu ditambahkan agar hanya cahaya eksitasi dengan panjang gelombang tertentu yang dapat melewati dan menyinari spesimen, sekaligus menyerap semua cahaya lainnya. Setelah disinari dengan cahaya eksitasi, setiap zat memancarkan fluoresensi tampak dengan panjang gelombang lebih panjang dari panjang gelombang iradiasi dalam waktu yang sangat singkat. Fluoresensi memiliki kekhususan dan umumnya lebih lemah dibandingkan cahaya eksitasi. Untuk mengamati fluoresensi tertentu, filter pemblokiran (atau penekan) perlu ditambahkan di belakang lensa objektif.
Fungsinya ada dua: pertama, menyerap dan menghalangi cahaya eksitasi memasuki lensa mata agar tidak mengganggu fluoresensi dan merusak mata; kedua, untuk memilih dan membiarkan fluoresensi tertentu melewatinya, memperlihatkan warna fluoresen tertentu. Dua jenis filter harus digunakan secara kombinasi.
