Persiapan dan Pengamatan Sampel Biologi untuk Mikroskop Elektron
Resolusi mikroskop tergantung pada panjang gelombang cahaya yang digunakan. Mikroskop elektron, yang muncul pada tahun 1933, mencapai resolusi yang jauh lebih tinggi daripada mikroskop optik karena penggunaan berkas elektron dengan panjang gelombang yang jauh lebih pendek daripada cahaya tampak sebagai sumber cahaya. Sumber cahaya yang berbeda juga menentukan serangkaian perbedaan antara mikroskop elektron dan mikroskop optik.
Berdasarkan perbedaan prinsip pencitraan berkas elektron dan cara kerjanya terhadap sampel, mikroskop elektron modern telah berkembang menjadi banyak jenis. Saat ini yang paling umum digunakan adalah mikroskop elektron transmisi dan mikroskop elektron pemindaian. Yang pertama memiliki perbesaran total yang dapat bervariasi antara 1000-10000000 kali, sedangkan yang kedua memiliki perbesaran total yang dapat bervariasi antara 20-300000 kali. Eksperimen ini terutama memperkenalkan persiapan dua jenis sampel mikroskop, mikroskop elektron transmisi dan mikroskop elektron pemindaian.
2, Peralatan
1. Strain Escherichia coli cenderung.
2. Larutan atau reagen: pentil asetat, asam sulfat pekat, etanol anhidrat, air steril, larutan berair 2% natrium fosfotungstat (pH 6,5-8,0), larutan polivinil formaldehida 0,3% (dilarutkan dalam kloroform), sitokrom c, amonium asetat, plasmid pBR322.
3. Instrumen atau alat lainnya antara lain mikroskop optik biasa, jaring tembaga, corong porselen, gelas kimia, cawan petri, penetes steril, pinset steril, peniti, kaca objek, pelat hitung, mesin pelapis vakum, pengering titik kritis, dan lain-lain.
3, langkah-langkah operasi
(1) Persiapan dan Pengamatan Sampel untuk Mikroskop Elektron Transmisi
1. Perawatan jaring logam
Sampel mikroskop optik ditempatkan pada kaca objek untuk diamati. Namun, pada cermin transmisi, karena elektron tidak dapat menembus lembaran kaca, bahan jaring hanya dapat digunakan sebagai pembawa, yang biasa disebut jaring pembawa. Jaring pembawa dapat dibagi menjadi beberapa spesifikasi karena bahan dan bentuknya yang berbeda, di antaranya jaring tembaga dengan jaring 200-400 (jumlah lubang) yang umum digunakan. Jaring tembaga harus dirawat sebelum digunakan untuk menghilangkan kotoran dan menjaganya tetap bersih, jika tidak maka akan mempengaruhi kualitas film pendukung dan kejernihan foto spesimen. Jaring tembaga 400 mesh yang digunakan dalam percobaan ini dapat diolah dengan metode berikut: pertama, rendam dan mengapung dengan pentil asetat selama beberapa jam, kemudian bilas beberapa kali dengan air suling, dan terakhir rendam dan mengapungkan jaring tembaga dalam etanol anhidrat untuk dehidrasi. Jika jaring tembaga masih belum bersih setelah cara di atas, dapat direndam dalam asam sulfat pekat encer (1:1) selama 1-2 menit, atau direbus dalam larutan NaOH 1% selama beberapa menit, dibilas beberapa kali dengan air suling, dan kemudian didehidrasi dalam etanol anhidrat untuk digunakan nanti.
