Metode penghitungan langsung mikroskop mikroba
Langkah-langkah percobaan (metode penghitungan langsung mikroskop mikroba)
1. Pengenceran
Encerkan suspensi ragi seduh secukupnya. Jika larutan bakteri tidak pekat, maka tidak perlu diencerkan.
2. Ruang pemeriksaan mikroskopis dan hitung
Sebelum menambahkan sampel, lakukan pemeriksaan mikroskopis pada ruang hitung pada papan hitung. Jika ada kotoran perlu dibersihkan terlebih dahulu sebelum dihitung.
3. Tambahkan sampel
Tutupi pelat penghitung sel darah yang bersih dan kering dengan kaca penutup, lalu gunakan pipet steril bermulut halus untuk meneteskan setetes kecil (jangan terlalu banyak) larutan ragi encer dari tepi kaca penutup. Biarkan larutan bakteri memasuki ruang hitung sepanjang celah melalui permeasi kapiler. Umumnya ruang hitung dapat diisi dengan larutan bakteri. Hati-hati jangan sampai menghasilkan gelembung.
4. Penghitungan mikroskopis
Setelah istirahat selama 5 menit, letakkan papan penghitung sel darah di atas panggung mikroskop, pertama-tama gunakan mikroskop berdaya rendah untuk mencari lokasi ruang hitung, kemudian beralih ke mikroskop berdaya tinggi untuk menghitung. Jika larutan bakteri ditemukan terlalu kental atau terlalu encer sebelum dihitung, pengenceran harus disesuaikan kembali sebelum dihitung. Persyaratan pengenceran sampel secara umum adalah harus terdapat sekitar 5-10 badan bakteri per sel kecil. Pilih 5 sel dari setiap ruang penghitungan (opsional 4 sel sudut dan tengah) untuk penghitungan. Miselium yang terletak pada garis grid umumnya hanya dihitung pada garis atas dan kanan. Jika ragi bertunas dan ukuran tunas mencapai setengah sel induk, dilakukan dua penghitungan bakteri. Untuk menghitung sampel, kandungan bakteri dalam sampel harus dihitung berdasarkan nilai yang diperoleh dari dua ruang hitung.
5. Bersihkan papan hitung sel darah
Setelah digunakan, bilas papan hitung sel darah dengan kolom air pada keran air. Jangan gunakan benda keras untuk mencucinya. Setelah dicuci, keringkan sendiri atau keringkan dengan pengering rambut. Pemeriksaan mikroskopis, amati apakah terdapat sisa badan bakteri atau endapan lain pada setiap sel kecil. Jika kurang bersih harus dicuci berkali-kali hingga bersih.
