Pengukuran Volume Blok Jaringan Menggunakan Mikroskop Biologis
Sejauh ini, kriofiksasi, pemotongan ultra-tipis beku, dan pengeringan-pembekuan adalah metode rutin untuk mikroskop sinar X-jaringan dan sel. Harap berikan rincian berikut mengenai metode ini:
Mikroskop biologis dengan lampu sorot dapat menggerakkan lampu sorot ke atas dan ke bawah untuk mencapai kecerahan sedang, dan bukaan bukaan variabel juga dapat diubah untuk mencapai kecerahan sedang. Jika cahayanya berasal dari matahari, lampu sorot dapat dinaikkan dengan tepat dan bukaan cahaya variabel dapat diperbesar dengan tepat. Jika cahayanya terlalu kuat, lampu sorot dapat diturunkan dengan tepat, dan bukaan persimpangan dapat dikurangi dengan tepat. Jika Anda masih merasa terpesona dalam situasi ini, Anda dapat memilih untuk menempatkan filter yang sesuai pada braket di bawah sorotan. Pohon ek ini dapat mencapai kecerahan yang memuaskan Anda. Tentu saja, menyesuaikan posisi atas dan bawah lampu sorot dapat mengubah ukuran bukaan pembacaan cahaya dan memilih filter yang sesuai, yang memerlukan periode latihan dan pengalaman tertentu.
Masalah yang sangat penting dalam mikroskop biologis adalah proses pengambilan sampel dan isolasi sel. Setelah pengeringan-pembekuan dan penanaman resin (FD), bagian ultra-tipis yang dibekukan harus diproses secara hati-hati untuk memastikan bahwa kandungan 65 elemen setiap bagian tidak rusak selama pengamatan dan analisis. Karena banyaknya langkah dan biaya tinggi yang terlibat dalam mikroanalisis sinar-X, sangat disayangkan jika mengambil kesimpulan yang salah jika sel yang dianalisis rusak atau mati setelah pemrosesan yang lama dan multi-langkah. Sel miokard yang dipisahkan dengan perlakuan gelatinase memiliki dua bentuk, yang satu berbentuk batang panjang-dan yang lainnya berbentuk lingkaran. Yang terakhir mengacu pada sel-sel mati yang rusak selama proses pemisahan sel.
Kandungan dan distribusi elektrolit pada kedua jenis sel ini sangat berbeda jika dilihat melalui mikroskop biologis. Na sangat tinggi dan K sangat rendah pada kardiomiosit sirkular, dan konsentrasi Ca dalam dendrit linier sangat tinggi. Setelah diverifikasi dengan metode analisis lain, terbukti bahwa tingginya Na dan rendahnya K pada sel sirkular serta tingginya Ca pada mitokondria merupakan akibat dari kerusakan membran pada saat pemisahan sel. Metode fiksasi dingin pada sel dan jaringan sering kali melibatkan pendinginan terlebih dahulu dan kemudian menyimpannya dalam nitrogen cair. Fiksasi pendinginan sangat penting untuk efek pelestarian. Sel hidup atau jaringan segar kaya akan air, dan ketika dipadamkan, bagian sel atau jaringan yang bersentuhan langsung dengan zat pendingin (terutama bila menggunakan nitrogen cair untuk pendinginan) sering kali dibekukan dan difiksasi terlebih dahulu, membentuk "cangkang" yang menghalangi bagian tengah sel agar tidak hancur dan terfiksasi. Oleh karena itu, ketika melakukan mikroanalisis sinar X-, sering ditemukan bahwa kristal es terdapat di bagian tengah sel yang lebih besar. Untuk mencegah situasi ini terjadi, zat dengan titik leleh lebih tinggi dari nitrogen cair tetapi lebih rendah sebesar 806c digunakan sebagai zat pendingin. Zat tersebut banyak sekali, namun mudah didapat dan yang paling terjangkau adalah propana pekat (titik didih 42.120c, titik leleh 187.10c, berat molekul 44.1), yang juga memiliki laju pendinginan yang cepat. Namun kelemahannya adalah mudah terbakar.
