Pengantar Memilih Antara Mikroskop Terbalik dan Mikroskop Fluoresensi
Mikroskop adalah instrumen penting dalam kultur sel dan eksperimen turunan terkait. Saat ini terdapat berbagai macam jenis mikroskop yang beredar di pasaran, dan memilih mikroskop yang sesuai dengan kebutuhan dan cocok merupakan sebuah tantangan. Di bawah ini, kami akan memperkenalkan prinsip mikroskop terbalik dan mikroskop fluoresensi untuk memudahkan seleksi.
Susunan mikroskop terbalik sama dengan mikroskop biasa, terutama terdiri dari tiga bagian: bagian mekanis, bagian iluminasi, dan bagian optik. Komposisi mikroskop terbalik sama dengan mikroskop tegak biasa, hanya saja lensa objektif dan sistem penerangannya terbalik, yang pertama di bawah panggung dan yang terakhir di atas panggung. Struktur ini memungkinkan peningkatan yang signifikan dalam jarak efektif antara sistem pemfokusan iluminasi dan panggung, sehingga lebih mudah untuk menempatkan instrumen pengamatan yang lebih tebal seperti piring kultur dan botol kultur sel (tentu saja, slide kaca juga dapat diterima), sedangkan jarak kerja antara lensa objektif dan bahan tidak perlu terlalu jauh. Mikroskop terbalik digunakan oleh institusi kedokteran dan kesehatan, universitas, dan lembaga penelitian untuk mengamati mikroorganisme, sel, bakteri, kultur jaringan, suspensi, sedimen, dll. Mikroskop ini dapat terus mengamati proses reproduksi dan pembelahan sel dan bakteri dalam media kultur, dan dapat menangkap keadaan apa pun selama proses ini. Banyak digunakan dalam bidang seperti sitologi, parasitologi, onkologi, imunologi, rekayasa genetika, mikrobiologi industri, botani, dll.
Mikroskop fluoresensi digunakan untuk mempelajari penyerapan, transportasi, distribusi, dan lokalisasi zat di dalam sel. Untuk benda uji, ada dua cara untuk menghasilkan fluoresensi: fluoresensi spontan, yang langsung memancarkan fluoresensi setelah penyinaran UV; Fluoresensi sekunder terjadi ketika objek yang diamati diberi perlakuan dengan pewarna fluoresen dan kemudian disinari dengan sinar ultraviolet untuk memancarkan fluoresensi. Beberapa zat di dalam sel, seperti klorofil, menghasilkan fluoresensi spontan bila terkena radiasi ultraviolet; Beberapa zat sendiri tidak dapat memancarkan fluoresensi, tetapi jika diwarnai dengan pewarna fluoresen atau antibodi fluoresen, zat tersebut juga dapat memancarkan fluoresensi sekunder setelah disinari dengan sinar ultraviolet. Mikroskop fluoresensi menggunakan sumber cahaya titik yang sangat efisien untuk memancarkan panjang gelombang cahaya tertentu (sinar ultraviolet 365nm atau cahaya biru ungu 420nm) melalui sistem filter warna sebagai cahaya eksitasi, yang menggairahkan zat fluoresen di dalam spesimen untuk memancarkan berbagai warna fluoresensi, dan kemudian mengamati melalui perbesaran lensa objektif dan lensa mata. Dengan cara ini, bahkan dengan fluoresensi lemah di latar belakang yang kuat, ia mudah dikenali dan memiliki sensitivitas tinggi. Hal ini terutama digunakan untuk mempelajari struktur sel, fungsi, dan komposisi kimia.
