Metode pencitraan bidang terang dan gelap mikroskop fluoresensi
(1) Pencitraan medan terang (BFI), yang hanya memungkinkan elektron yang ditransmisikan di daerah paraksial melewati bukaan objektif, membentuk gambar gelap dengan latar belakang terang. Semakin kecil bukaan lensa objektif, semakin besar kontras gambar bidang terang; (2) Pencitraan medan gelap (DFI), yang hanya memungkinkan sebagian dari berkas hamburan sudut besar atau berkas difraksi kristal melewati bukaan lensa objektif, sekaligus menghalangi berkas yang ditransmisikan. Ini menciptakan gambar grafis yang cerah dengan latar belakang gelap. Metode pencitraan medan gelap ini dapat meningkatkan kontras gambar dan merupakan metode pencitraan yang penting.
Ada sekitar empat metode mikroskop fluoresensi untuk mencapai pencitraan medan gelap: (1) mempertahankan penerangan vertikal di sepanjang sumbu optik sambil menggerakkan bukaan objektif; (2) Penggunaan iluminasi miring untuk memperoleh berkas tersebar pada arah sumbu optik disebut Center Dark Field Imaging (CDFI); (3) Bukaan lensa objektif dengan pemblokiran sinar pusat dan area transparan melingkar; (4) Gunakan lampu sorot transparan melingkar untuk mendeteksi cahaya dan bukaan objektif dengan lubang melingkar di tengah. Metode * di sini sederhana dan nyaman, namun menggunakan pencitraan elektronik di wilayah lengan terjauh, sehingga menghasilkan penyimpangan yang besar dan kualitas gambar yang buruk. Metode kedua dapat menghindari kelemahan di atas, namun bukaan objektif mikroskop fluoresensi Leica hanya menerima sebagian kecil elektron terdifraksi yang tersebar, sehingga menghasilkan efisiensi yang lebih rendah. Sisi aperture sering kali dibombardir oleh elektron dalam jumlah besar, yang dapat dengan mudah menyebabkan polusi asimetris dan mempengaruhi kualitas gambar. Tujuan melingkar telah diperbaiki dalam hal ini, namun kelemahannya adalah sulit untuk dibuat dan sulit untuk mencapai simetri aksial yang lengkap. Mengingat persyaratan yang relatif longgar untuk sistem pencahayaan, solusi terakhir dapat diadopsi, yang melibatkan penambahan bukaan melingkar pada kondensor untuk memberikan penerangan berongga pada sampel. Efek dari perangkat ini. Resolusi gambarnya bisa mendekati resolusi gambar bidang terang, sementara kontrasnya jauh lebih baik.
