Pernahkah Anda memahami prinsip dasar mikroskop fase kontras?
Mikroskop kontras fase ditemukan oleh ilmuwan Belanda Zernike pada tahun 1935 untuk mengamati spesimen yang tidak diwarnai. Untuk sel hidup dan spesimen biologis yang tidak diwarnai, karena perbedaan indeks bias dan ketebalan struktur mikro setiap bagian sel, ketika gelombang cahaya melewatinya, panjang gelombang dan amplitudo tidak berubah, hanya fase yang berubah (perbedaan amplitudo ), yang tidak terlihat oleh mata manusia. mengamati. Mikroskop kontras fase mengubah perbedaan fase dan menggunakan difraksi cahaya dan fenomena interferensi untuk mengubah perbedaan fase menjadi perbedaan amplitudo untuk mengamati sel hidup dan spesimen yang tidak ternoda. Perbedaan antara mikroskop kontras fase dan mikroskop biasa adalah diafragma annular digunakan sebagai pengganti diafragma variabel, lensa objektif dengan pelat fase digunakan sebagai pengganti lensa objektif biasa, dan teleskop untuk koaksialitas disediakan.
Prinsip dasar mikroskop fase kontras:
Dengan menggunakan perbedaan indeks bias dan ketebalan antara berbagai komponen struktural objek, perbedaan jalur optik yang melewati berbagai bagian objek diubah menjadi perbedaan amplitudo (intensitas cahaya), dan melalui lensa kondensor dengan diafragma annular dan beda fasa dengan pelat fasa Lensa objektif menyadari pengamatan mikroskop. Ini terutama digunakan untuk mengamati sel hidup atau bagian jaringan yang tidak diwarnai, dan terkadang juga dapat digunakan untuk mengamati sampel bernoda yang kurang kontras.
Perbedaan jalur optik dari cahaya tampak yang melewati spesimen diubah menjadi perbedaan amplitudo, sehingga meningkatkan kontras antara berbagai struktur dan membuat berbagai struktur terlihat jelas. Cahaya dibiaskan setelah melewati spesimen, menyimpang dari jalur optik asli, dan tertunda 1/4λ (panjang gelombang). Jika dinaikkan atau diturunkan 1/4λ, perbedaan jalur optik menjadi 1/2λ, dan kedua berkas berinterferensi setelah sumbu cahaya Memperkuat, menambah atau mengurangi amplitudo, meningkatkan kontras.
Mikroskop kontras fase memiliki dua fungsi yang tidak dimiliki mikroskop lain: ① memisahkan cahaya langsung (cahaya latar dalam bidang pandang) dari cahaya yang dibiaskan oleh objek; ② menghilangkan sekitar setengah panjang gelombang dari fasa sehingga tidak dapat berinteraksi, menghasilkan perubahan intensitas.
