Fungsi Setiap Filter dalam Mikroskop Fluoresensi
Masalah paling kritis dengan mikroskop fluoresensi adalah kombinasi filter optik. Baik filter eksitasi maupun filter pelindung harus sesuai untuk bahan fluoresen yang diamati dan cocok satu sama lain. Untuk beberapa aplikasi tertentu, jika terjadi kesalahan dalam pemilihan filter, dapat menyebabkan kesalahpahaman dan bahkan hasil yang salah. Pencapaian teknologi mikroskop fluoresensi tidak dapat dipisahkan dari-filter berkualitas tinggi dan kelompok filter yang sangat cocok. Ada beberapa jenis filter untuk mikroskop fluoresensi.
1. Filter penyerap panas
Filter penyerap panas adalah filter yang diperlukan untuk mencegah radiasi termal dalam spektrum sumber cahaya merusak sistem optik. Mikroskop canggih awal dilengkapi dengan botol berbentuk drum yang dapat menampung air suling sebagai alat penyerap panas. Mikroskop penelitian skala besar-modern dilengkapi dengan filter kaca penyerap panas dalam kotak cahaya sumber cahaya atau ruang lampu, yang berupa lembaran kaca transparan dan agak kuning. Filter Leitz KG1 (2 mm) dan BG38 (4 mm) dapat mentransmisikan hampir semua spektrum sinar ultraviolet dan cahaya tampak, dengan tingkat transmisi cahaya hingga 98%. Ia hanya secara selektif menyerap radiasi fototermal inframerah.
2. Filter eksitasi
Filter eksitasi dapat secara selektif menyerap garis spektrum panjang gelombang panjang dan hanya mentransmisikan sinar ultraviolet. Filter cahaya ungu, biru, dan hijau adalah filter eksitasi. Zeiss, Reichert, seri B Olympus, seri G, seri BG, seri UG Shott, seri H, G, BP Opton, seri BP Leitz, dan filter optik lainnya semuanya merupakan filter eksitasi.
3. Filter pemblokiran
Filter pemblokiran adalah filter yang secara selektif menyerap garis spektral gelombang pendek dan sinar infra merah sekaligus memungkinkan gelombang yang lebih panjang terlihat. Fungsinya agar pengamat dapat melihat fluoresensi yang tereksitasi oleh objek yang diperiksa, sekaligus melindungi kornea pengamat dari kerusakan akibat sinar UV.
4. Filter pemisahan warna
Filter pemisahan warna adalah cermin filter yang memantulkan cahaya eksitasi ke objek yang diperiksa, menyebabkan objek memancarkan fluoresensi, dan kemudian mentransmisikan fluoresensi tersebut ke lensa mata. Filter jenis ini hanya dapat digunakan pada kondensor cahaya jatuh, sedangkan mikroskop fluoresensi cahaya yang ditransmisikan tidak memerlukan pemisahan warna.
5. Filter interferensi
Filter interferensi adalah jenis filter eksitasi-performa tinggi. Ini adalah filter yang dibuat dengan menumpuk beberapa film logam tipis di antara dua lembar kaca yang dipoles. Indeks bias setiap film logam tipis berbeda-beda, sehingga garis spektral dari berbagai panjang gelombang sumber cahaya iluminasi berulang kali dipantulkan pada setiap film logam. Beberapa garis spektral dengan panjang gelombang tertentu dihilangkan oleh interferensi destruktif, sementara garis spektral lainnya diperkuat oleh interferensi aditif dan ditransmisikan melaluinya. Hal ini menghasilkan filter dengan spektrum transmisi sempit dan lebar setengah puncak hanya 6-20nm. Transmisinya bisa mencapai 60% -70%.
