Operasi dasar mikroskop fluoresensi
A. Matikan lampu di ruangan dan nyalakan lampu merkuri mikroskop;
B. Pilih filter yang sesuai sesuai dengan fluorescein yang diberi label oleh sampel;
C. Tempatkan sampel dan temukan bidang pandang yang sesuai;
D. Jika Anda perlu mengambil gambar, harap konfirmasikan bahwa film berwarna dipasang di kamera;
e. Nyalakan perangkat Selfie, pilih gigi manual, biasanya kecepatan pemotretan dalam 0.5-10 detik;
F. Setelah digunakan, matikan semua daya dan catat penggunaan. itu
itu
3. Metode perekaman gambar fluoresensi
Gambar fluoresensi yang dilihat oleh mikroskop fluoresensi memiliki karakteristik morfologis dan warna serta kecerahan fluoresensi. Saat menilai hasil, keduanya harus digabungkan untuk penilaian yang komprehensif. Hasilnya dicatat berdasarkan indikator subyektif, yaitu pengamatan visual oleh pekerja. Sebagai pengamatan kualitatif umum, pada dasarnya dapat diandalkan. Dengan perkembangan teknologi dan ilmu pengetahuan, indikator objektif digunakan untuk mencatat hasil penilaian dalam berbagai tingkatan, seperti spektrofotometer sel, penganalisis citra, dan instrumen lainnya. Namun, hasil yang dicatat oleh instrumen ini juga harus digabungkan dengan penilaian subjektif. itu
Fotografi mikroskop fluoresensi sangat diperlukan untuk merekam gambar fluoresensi. Karena fluoresensi mudah memudar dan melemah, perlu untuk mencatat hasilnya secara real time. Metode ini pada dasarnya sama dengan fotomikrografi biasa. Hanya perlu menggunakan film fotosensitif berkecepatan tinggi. Karena sinar ultraviolet memiliki efek yang kuat pada pendinginan fluoresensi, seperti penanda FITC, kecerahan fluoresensi akan berkurang hingga 50 persen saat disinari dengan sinar ultraviolet selama 30 detik. Oleh karena itu, jika kecepatan pencahayaan terlalu lambat, gambar berpendar tidak dapat diambil. Mikroskop fluoresensi penelitian umum memiliki perangkat sistem fotomikrografi semi-otomatis atau sepenuhnya otomatis. itu
itu
4. Tindakan Pencegahan untuk Menggunakan Mikroskopi Fluoresensi
A. Beroperasi secara ketat sesuai dengan persyaratan instruksi pabrik mikroskop fluoresensi, dan jangan mengubah program sesuka hati. itu
B. Pemeriksaan harus dilakukan di ruangan gelap. Setelah memasuki kamar gelap, sambungkan catu daya dan nyalakan lampu merkuri bertekanan sangat tinggi selama 5-15 menit. Setelah cahaya kuat dari sumber cahaya stabil, mata benar-benar beradaptasi dengan kamar gelap, lalu mulai mengamati spesimen. itu
C. Untuk mencegah kerusakan mata akibat sinar ultraviolet, kenakan kacamata pelindung saat menyesuaikan sumber cahaya. itu
D. Waktu pemeriksaan sebaiknya 1-2 jam setiap kali. Jika melebihi 90 menit, intensitas cahaya dari lampu merkuri bertekanan sangat tinggi akan berkurang secara bertahap dan fluoresensi akan melemah; setelah spesimen disinari dengan sinar ultraviolet selama 3-5 menit, fluoresensi juga akan melemah secara signifikan; oleh karena itu, paling lama tidak boleh melebihi 2-3 jam. . itu
e. Kehidupan sumber cahaya mikroskop fluoresen terbatas, dan spesimen harus diperiksa secara terpusat untuk menghemat waktu dan melindungi sumber cahaya. Saat cuaca panas, kipas harus ditambahkan untuk menghilangkan panas, dan bola lampu baru harus dicatat dari awal waktu pemakaiannya. Bila Anda ingin menggunakannya lagi setelah lampu padam, Anda harus menunggu hingga bohlam cukup dingin sebelum menyalakannya. Hindari menyalakan sumber cahaya beberapa kali sehari. itu
F. Amati spesimen segera setelah pewarnaan, karena fluoresensi secara bertahap akan melemah seiring waktu. Jika spesimen disimpan dalam kantong plastik polietilen pada suhu 4 derajat, waktu pelemahan fluoresensi dapat ditunda dan agen pemasangan dapat dicegah agar tidak menguap. itu
G. Standar penilaian kecerahan fluoresensi: umumnya dibagi menjadi empat tingkat, yaitu, "-" berarti tidak ada atau lemah fluoresensi dapat dilihat. " plus " berarti hanya fluoresensi yang terlihat jelas. " plus plus " berarti fluoresensi terang terlihat. " plus plus plus " berarti fluoresensi terang terlihat.
