Metode penghitungan mikrobiologis langsung
Menggunakan hemositometer untuk secara langsung menghitung mikroorganisme di bawah mikroskop adalah metode yang umum digunakan untuk penghitungan mikroba. Keuntungan dari metode ini adalah intuisi dan kecepatannya. Tempatkan suspensi bakteri yang diencerkan dengan tepat (atau suspensi spora) di ruang penghitungan antara slide hemositometer dan slide penutup, dan menghitung di bawah mikroskop. Karena volume konstan ruang penghitungan (0. 1mm2), jumlah total mikroorganisme per satuan volume dapat dikonversi berdasarkan jumlah mikroorganisme yang diamati di bawah mikroskop. Karena fakta bahwa metode ini menghitung jumlah sel bakteri hidup dan mati, ia juga dikenal sebagai metode penghitungan total bakteri.
Piring penghitung sel darah biasanya merupakan slide kaca yang dirancang khusus dengan empat alur yang membentuk tiga platform. Platform tengah dibagi menjadi dua dengan alur horizontal pendek, dan setiap sisi platform diukir dengan kisi. Setiap kisi dibagi menjadi sembilan kotak besar, dan kotak besar di tengah adalah ruang penghitungan, di mana penghitungan mikroba dilakukan.
Umumnya ada dua spesifikasi untuk skala ruang penghitungan. Salah satunya adalah bahwa kotak besar dibagi menjadi 16 kotak tengah, dan setiap kotak tengah selanjutnya dibagi menjadi 25 kotak kecil (Gambar VIII -2); Metode lain adalah membagi persegi besar menjadi 25 kotak tengah, dan setiap kotak tengah selanjutnya dibagi menjadi 16 kotak kecil (Gambar VIII -1, c). Tetapi terlepas dari ukuran papan penghitungan, jumlah kotak kecil di setiap kotak besar adalah sama, yaitu, 16 × 25=400 kotak kecil.
Jika panjang sisi setiap kotak besar adalah 1mm, luas setiap kotak besar adalah 1mm2. Setelah ditutup dengan kaca penutup, ketinggian antara slide dan kaca penutup adalah 0. 1mm, sehingga volume ruang penghitungan adalah 0. 1mm3.
Saat menghitung, jumlah total bakteri dalam lima kotak biasanya dihitung, dan kemudian nilai rata -rata setiap kuadrat diperoleh. Mengalikannya dengan 16 atau 25 memberikan jumlah total bakteri dalam kotak besar, yang kemudian dikonversi menjadi jumlah total bakteri dalam 1 mL larutan bakteri.
