Catatan dan tip tentang penggunaan beberapa mikroskop fase kontras
1) Pasang perangkat kontras fase: lepaskan lensa kondensor dari mikroskop biasa, dan pasang lensa kondensor dengan diafragma annular pada mikroskop yang cocok; lepaskan lensa objektif biasa dari mikroskop, dan ganti dengan lensa objektif dengan pelat fase; ganti eyepiece dengan Focusing eyepieces untuk mikroskop fase kontras; filter hijau khusus (terkadang tidak diperlukan) ditempatkan di pintu masuk sumber cahaya.
2) Penjajaran cahaya dan fokus: Sesuaikan lensa mata pemfokusan dan sekrup penyetel ketebalan hingga lingkaran putih dan lingkaran hitam terlihat jelas di bidang pandang. Lingkaran hitam diperbaiki, dan lingkaran putih dapat dipindahkan dengan menyesuaikan sekrup pada perangkat kondensor, sehingga lingkaran hitam dan lingkaran putih benar-benar bersamaan. Lepas lensa mata fokus dan ganti dengan lensa mata asli mikroskop untuk diperiksa.
Analisis masalah dalam penggunaan mikroskop fase kontras
1. Pengaruh ketebalan sampel Saat melakukan pengamatan fase kontras, ketebalan sampel harus 5 μm atau lebih tipis. Saat menggunakan sampel yang lebih tebal, lapisan atas sampel sangat jernih, tetapi lapisan dalam akan buram dan menyebabkan gangguan pergeseran fasa. dan hamburan cahaya.
2. Pengaruh kaca penutup dan kaca geser Sampel harus ditutup dengan kaca penutup, jika tidak, cincin terang diafragma annular dan cincin gelap pelat fase sulit untuk tumpang tindih. Pengamatan fase kontras juga memiliki persyaratan tinggi pada kualitas kaca kaca slide dan kaca penutup. Ketika ada goresan, ketebalan tidak rata atau ketidakrataan, distorsi cincin terang dan interferensi fasa akan terjadi. Selain itu, bila slide terlalu tebal atau terlalu tipis, cincin terang diafragma annular akan menjadi lebih besar atau lebih kecil.
3. Efek halo dan fading Dalam proses pencitraan mikroskop kontras fase, ketika suatu struktur menjadi gelap karena penundaan fase, itu bukan hilangnya cahaya, tetapi hasil redistribusi cahaya pada bidang gambar. Jadi cahaya yang tampaknya hilang di area gelap akan muncul sebagai lingkaran terang di sekitar objek yang lebih gelap. Ini adalah kerugian dari mikroskop kontras fase, yang menghalangi pengamatan struktur halus, dan fenomena halo lebih serius ketika diafragma annular sangat sempit. Fenomena lain dalam mikroskop kontras fase adalah efek naungan, yang mengacu pada hilangnya kontras di tepi area yang lebih luas dengan penundaan fase yang sama saat diamati dengan kontras fase.
4. Pembalikan fasa Ketika n'n, kontras terang dan gelap bayangan hanya berlawanan, yang disebut pembalikan fasa. Tidak dapat dikenali ketika perbedaan fase δ=0, dan kontras menjadi lebih besar dengan peningkatan δ, dan inversi fase akan muncul ketika δ terus meningkat ke nilai tertentu. Saat menggunakan lensa objektif dengan nilai serapan tinggi (kontras tinggi) 90 persen, nilai transformasi ini sekitar 0.55λ, dan saat menggunakan lensa objektif dengan nilai serapan standar 70 persen, nilainya sekitar 0,33λ . Tujuan dengan nilai absorbansi yang lebih tinggi harus digunakan untuk menyelesaikan perbedaan jalur optik yang lebih kecil.
