(Perbedaan antara mikroskop fluoresensi (dua foton, confocal) dan mikroskop biasa
Mikroskop fluoresensi adalah penggunaan sinar ultraviolet sebagai sumber cahaya, digunakan untuk menyinari benda yang akan diperiksa, sehingga benda tersebut mengeluarkan sumber cahaya, kemudian dilakukan pengamatan terhadap benda tersebut di bawah mikroskop. Hal ini terutama digunakan untuk sel imunofluoresensi, yang terutama terdiri dari sumber cahaya, sistem pelat filter dan sistem optik untuk mengamati gambar fluoresensi sampel melalui pembesaran lensa mata dan lensa objektif. Mari kita lihat perbedaan antara mikroskop fluoresensi dan mikroskop optik biasa.
1, dalam mode penerangan
Penerangan mikroskop fluoresensi umumnya dengan tipe jatuh, yaitu sumber cahaya melalui lensa objektif untuk diletakkan pada sampel uji.
2, dalam resolusi
Mikroskop fluoresensi menggunakan sinar ultraviolet sebagai sumber cahaya, panjang gelombangnya relatif pendek, namun resolusinya lebih tinggi dari mikroskop optik biasa.
3, perbedaan filternya
Mikroskop fluoresensi adalah penggunaan dua filter khusus, di depan sumber cahaya digunakan untuk menyaring cahaya tampak, antara lensa objektif dan lensa mata untuk menyaring sinar ultraviolet, yang dapat melindungi mata manusia.
Mikroskop fluoresensi juga termasuk dalam jenis mikroskop optik, terutama mikroskop fluoresensi dengan panjang gelombang eksitasi pendek, sehingga hal ini menyebabkan mikroskop fluoresensi dan konstruksi struktur lain-lain mikroskop biasa dan penggunaan yang berbeda, mikroskop fluoresensi sebagian besar memiliki fungsi menangkap cahaya lemah yang baik, sehingga dalam fluoresensi yang sangat lemah, kemampuan pencitraannya dan bagus. Ditambah dengan perbaikan terus-menerus pada mikroskop fluoresensi dalam beberapa tahun terakhir, kebisingan juga sangat berkurang. Oleh karena itu, semakin banyak mikroskop fluoresensi yang diterapkan.
Mikroskop fluoresensi dua foton memiliki banyak keunggulan:
(1) Cahaya dengan panjang gelombang yang lebih panjang tidak terlalu terpengaruh oleh hamburan dibandingkan cahaya dengan panjang gelombang yang lebih pendek dengan mudah menembus spesimen;
(2) Molekul fluoresen di luar bidang fokus tidak tereksitasi sehingga lebih banyak cahaya eksitasi yang mencapai bidang fokus, sehingga cahaya eksitasi dapat menembus lebih dalam ke dalam spesimen;
3) Cahaya inframerah-dekat dengan panjang gelombang yang lebih panjang kurang beracun bagi sel dibandingkan dengan panjang gelombang yang lebih pendek;
4) Saat menggunakan mikroskop dua foton untuk mengamati spesimen, photobleaching dan fototoksisitas hanya terjadi pada bidang fokus. Oleh karena itu, mikroskop dua foton lebih cocok daripada mikroskop foton tunggal untuk mengamati spesimen tebal, untuk mengamati sel hidup, atau untuk melakukan eksperimen pemutihan foto spot.
