Penerapan dan penggunaan prinsip mikroskop fluoresensi
Prinsip dan karakteristik struktur mikroskop fluoresensi: Mikroskop fluoresensi menggunakan sumber cahaya titik dengan efisiensi cahaya tinggi untuk memancarkan cahaya dengan panjang gelombang tertentu (seperti sinar ultraviolet 3650 inci atau cahaya ungu-biru 4200 inci) melalui sistem filter warna sebagai cahaya eksitasi untuk merangsang fluoresensi dalam spesimen. Setelah zat tersebut mengeluarkan fluoresensi berbagai warna, kemudian diamati melalui perbesaran lensa objektif dan lensa okuler. Dengan cara ini, di bawah latar belakang kontras yang kuat, meskipun fluoresensinya sangat lemah, mudah dikenali dan memiliki sensitivitas tinggi. Hal ini terutama digunakan untuk mempelajari struktur dan fungsi sel serta komposisi kimia. Struktur dasar mikroskop fluoresensi terdiri dari mikroskop optik biasa ditambah beberapa aksesoris (seperti sumber cahaya fluoresensi, filter eksitasi, pemisah berkas dua warna, filter pemblokiran, dll.). Sumber cahaya fluoresen - umumnya menggunakan lampu merkuri bertekanan sangat tinggi (50 hingga 200W), yang dapat memancarkan cahaya dengan berbagai panjang gelombang, tetapi setiap zat fluoresen memiliki panjang gelombang eksitasi yang menghasilkan fluoresensi terkuat, sehingga filter eksitasi (Umumnya ada filter eksitasi ultraviolet, ungu, biru dan hijau), yang hanya memungkinkan cahaya eksitasi dengan panjang gelombang tertentu melewati dan menerangi spesimen, sekaligus menyerap semua cahaya lainnya. Setelah setiap zat disinari dengan cahaya eksitasi, ia memancarkan fluoresensi tampak dengan panjang gelombang lebih panjang dari panjang gelombang iradiasi dalam waktu yang sangat singkat. Fluoresensi bersifat spesifik dan umumnya lebih lemah dibandingkan cahaya eksitasi. Untuk mengamati fluoresensi tertentu, diperlukan filter pemblokiran (atau penekan) di belakang lensa objektif. Ia memiliki dua fungsi: satu untuk menyerap dan menghalangi cahaya eksitasi memasuki lensa mata agar tidak mengganggu fluoresensi dan merusak mata; yang lainnya adalah memilih dan membiarkan fluoresensi tertentu lewat untuk menunjukkan warna fluoresensi tertentu. Kedua filter harus dipilih dan digunakan bersama.
