Prinsip kerja mikroskop confocal laser
Prinsip kerja mikroskop confocal laser
Mikroskop confocal laser Olympus adalah detektor yang dapat memperoleh sinyal. Prinsip kerjanya adalah sumber cahaya titik akan dicitrakan sebagai titik yang diperbesar yang disebut "Airy disk" setelah melewati mikroskop fluoresensi. Dalam mikroskop confocal interferometri cahaya putih standar, cahaya yang dipancarkan di luar bidang fokus diblokir oleh lubang jarum yang ukurannya menentukan berapa banyak disk Airy yang dapat masuk ke detektor. Semakin kecil lubang jarum, semakin tajam gambar yang dihasilkan, dan semakin redup gambar tersebut karena sebagian besar cahaya hilang. Semakin kecil lubang jarum aperture, semakin baik resolusinya, namun—sekali lagi—semakin banyak sinyal cahaya yang hilang. Mikroskop confocal laser Olympus dapat memberikan gambar CCD berwarna dan gambar confocal pemindaian laser secara bersamaan. Mikroskop laser confocal Olympus mampu mengukur ketinggian melalui pengaturan confocal dari satu sumber cahaya, satu sampel, dan satu detektor. Ketika sampel terletak pada bidang fokus lensa objektif dan sinar laser yang dipantulkan dari permukaan sampel difokuskan ke dalam bukaan confocal, fotodetektor akan menerima sinyal dari sampel. Saat sampel berada pada posisi di luar fokus, bukaan confocal tidak menerima sinyal laser, sehingga hanya sinyal dalam fokus yang dikumpulkan. Fitur ini dapat mewujudkan fungsi pemisahan optik dari mikroskop confocal laser Olympus.
Keuntungan Mikroskop Laser Confocal
1. Menggunakan sinar laser sebagai sumber cahaya, setelah probe fluoresen yang sesuai ditandai, sampel dipindai titik demi titik untuk mendapatkan gambar penampang optik dua dimensi lapis demi lapis. Ia mempunyai fungsi "CT sel" dan dapat didukung oleh perangkat lunak rekonstruksi tiga dimensi komputer untuk memperoleh gambar tiga dimensi, yang dapat diputar pada sudut manapun untuk mengamati bentuk tiga dimensi dan hubungan spasial sel dan jaringan;
2. Dapat mengamati sel dan jaringan hidup tanpa kerusakan, dan secara dinamis mengukur informasi fisiologis sel hidup seperti konsentrasi ion Ca dan nilai pH dalam sel;
3. Dapat mengukur fluiditas membran sel, komunikasi antar sel, fusi sel, elastisitas sitoskeleton, dll., dan dapat digunakan sebagai "pisau ringan" untuk menyelesaikan "operasi" intraseluler. Teknologi ini memungkinkan observasi dan pengukuran sel dan jaringan hidup secara dinamis dan kuantitatif secara in situ.
