Apa persyaratan sampel untuk mikroskop cahaya?
Dalam proses persiapan sampel mikroskop optik, ketebalan potongan sampel antara 2 dan 25um; ketebalan irisan mikroskop elektron berada dalam 50-100nm (kecuali untuk mikroskop elektron tegangan tinggi, ketebalan sampel dapat mencapai 1um), sehingga metode irisan yang digunakan tidak semuanya sama.
Dalam hal pembawa, pembawa bagian mikroskop optik adalah slide kaca, dan pembawa bagian mikroskop elektron adalah kisi pembawa.
Dalam hal fiksasi, bagian mikroskop optik difiksasi dengan fiksatif majemuk, sedangkan bagian mikroskop elektron difiksasi berulang kali dengan fiksatif tunggal.
Dalam hal pewarnaan, pewarnaan sampel optik relatif sederhana. Menurut sampel pengamatan yang berbeda dan jenis mikroskop optik, biasanya cukup menggunakan beberapa noda tetap. Ada banyak metode pewarnaan ulang sampel mikroskop elektron, dan juga sangat rumit, seperti pewarnaan negatif, pewarnaan perak dan sebagainya.
Dalam hal embedding, parafin, collodion, gelatin, dll digunakan sebagai agen embedding untuk bagian mikroskop optik; resin epoksi, resin polistirena, resin isobutilena, dan resin yang larut dalam air digunakan sebagai bahan penyemat untuk bagian mikroskop elektron.
Agar bidang pandang mikroskop menerima iluminasi yang seragam dan memadai, sistem jalur optik iluminasi perlu disesuaikan saat pertama kali memasang dan men-debug mikroskop. persyaratan. Selain itu, memahami dengan benar penyesuaian sistem jalur optik iluminasi merupakan langkah yang diperlukan setelah mengganti bola lampu dalam proses penggunaan mikroskop, dan ini juga merupakan sarana yang diperlukan untuk menguji kinerja mikroskop dari waktu ke waktu dalam proses penggunaan sehari-hari. Penyesuaian sistem jalur optik penerangan mikroskop terutama mencakup 4 item berikut: 1. Penyesuaian awal ruang lampu sumber pencahayaan di luar mikroskop ① Pertama, buka cangkang ruang lampu, dan masukkan bohlam halogen ke dalam soket dengan menekan klip musim semi. Kotoran seperti sidik jari yang tertinggal pada bohlam akan mempengaruhi umur bohlam. ②Tempatkan ruang lampu di atas meja, setelah menyalakan daya, gunakan obeng khusus untuk menyesuaikan lubang kenop pemfokusan lampu (ditandai dengan "←→"), sehingga filamen diproyeksikan ke dinding 1-2 m jauhnya, dan gambar filamen disesuaikan. Kemudian sesuaikan ketinggian lampu untuk menyesuaikan lubang filamen (ditandai dengan "──") agar posisi filamen sesuai; kemudian sesuaikan lubang sekrup penyesuaian posisi kiri dan kanan lampu (ditandai dengan "──") untuk membuat posisi filamen kiri dan kanan sesuai.
2. Pemeriksaan dan koreksi posisi sumber cahaya iluminator (filamen) pada mikroskop bertujuan untuk mengatur bayangan ujung iluminator ke bidang pandang lensa objektif, dan memastikan bahwa bidang pandang mikroskop sepenuhnya dan seragam diterima dari perspektif sumber cahaya. Pencahayaan, yang merupakan prasyarat untuk menyesuaikan sistem pencahayaan Kühler. Alat dasar yang diperlukan: Teleskop tengah dilengkapi dengan pembelian mikroskop. ① Cabut selongsong kaca buram di rumah lampu dan pasang kembali rumah lampu pada mikroskop ② Pilih lensa objektif 10x, nyalakan program sumber cahaya untuk menemukan sampel dan atur fokus dengan jelas, lalu gunakan lensa objektif 40x lensa untuk memfokuskan sampel dengan jelas (lensa objektif 40x Seluruh gambar filamen dapat dilihat dengan jelas); ③ Buka diafragma bukaan dan diafragma bidang kondensor secara maksimal; ④ Cabut salah satu eyepiece, ganti dengan teropong tengah, pegang bagian putihnya, dan rentangkan eyepiece hitam dengan tangan lainnya, Gambar filamen dapat dilihat di bidang penglihatan; ⑤Jika posisi filamen tidak sesuai, sesuaikan lubang "──", sesuaikan gambar filamen ke arah horizontal, sesuaikan lubang "──", dan sesuaikan gambar filamen ke arah vertikal hingga Sesuaikan gambar filamen ke lingkaran gambar yang hanya mengisi bukaan lensa objektif; ⑥ Setelah penyetelan, masukkan selongsong kaca buram kembali ke posisi semula, cabut teleskop pemusatan, dan ganti lensa mata untuk penyetelan berikutnya. Penyesuaian ruang lampu sumber cahaya iluminasi yang disebutkan di atas di luar mikroskop dan kalibrasi posisi iluminator sumber cahaya di dalam mikroskop hanya perlu dilakukan ketika mikroskop dipasang dan di-debug untuk pertama kalinya dan bola lampu diganti. Jika terjadi kebingungan, Anda dapat mengembalikannya ke keadaan semula sesuai dengan langkah-langkah di atas.
3. Penyesuaian sistem penerangan Kohler (Kohler) yang benar Penyesuaian mikroskop yang benar, salah satu tugas utamanya adalah penyesuaian sistem jalur cahaya penerangan, dan kuncinya adalah penyesuaian sistem penerangan Kohler. Bagi setiap orang yang menggunakan mikroskop, terutama mereka yang mengambil mikrograf, harus memiliki pemahaman dan penguasaan tertentu tentang prinsip-prinsip sistem penerangan Kühler dan langkah-langkah penyesuaiannya, sehingga mereka dapat sepenuhnya memainkan fungsi mikroskop. Foto yang dihasilkan bisa lebih konsisten dan sempurna efeknya. Prinsip sistem iluminasi Kühler sederhana: cahaya yang dipancarkan oleh titik mana pun pada iluminator sumber cahaya dapat menerangi bidang pandang mikroskop, dan cahaya yang dipancarkan oleh setiap titik pada iluminator sumber cahaya dikumpulkan, dan masuk ke dalam bidang pandang mikroskop. Penerangan yang sangat memadai dan seragam tercapai. Tujuan penyesuaian sistem iluminasi Kuhler adalah untuk mendapatkan iluminasi yang seragam dan cukup untuk bidang pandang yang diamati, dan untuk mencegah cahaya liar mempengaruhi atau mengganggu sistem pencitraan, untuk menghindari pembentukan kabut pada negatif selama fotografi. Komponen penting dari sistem penerangan Kühler penyetelan tinggi: diafragma lapangan, sistem kondensor dengan penyetelan sumbu. ① Pilih 10× lensa objektif dan lensa okuler 10× ② Pasang lensa depan kondensor ke jalur optik, sesuaikan diafragma apertur ke posisi sedang (tidak terlalu besar atau tidak terlalu kecil), lalu naikkan kondensor ke posisi atas, dan sesuaikan meja putar kondensor ke posisi Bright field "J" ③ Sesuaikan diafragma medan ke minimum (0,1)
④ Letakkan sampel biologis tersegel di atas panggung, nyalakan sumber cahaya, dan fokuskan dengan jelas
⑤ Area yang diterangi secara lokal atau titik terang akan muncul di bidang pandang, yang merupakan gambar kabur dari diafragma bidang, di mana detail sampel dapat terlihat dengan jelas; Lihat detail sampel dengan jelas
⑥ Turunkan kondensor sedikit, sehingga titik terang di bidang pandang secara bertahap menyempit dan secara bertahap menjadi gambar poligonal yang jelas, yang merupakan gambar yang jelas dari diafragma bidang;
⑦ Dalam keadaan normal, gambar poligonal tidak berada di tengah bidang pandang. Anda perlu menyesuaikan sepasang sekrup tengah kondensor untuk menyesuaikan gambar poligonal bidang pandang ke posisi tengah;
⑧ Buka diafragma bidang pandang secara bertahap untuk membuat gambar poligonal menjadi poligon tertulis dari bidang pandang, dan selanjutnya periksa kondisi pelurusan. Jika penjajaran tidak ideal, teruskan sedikit penyetelan sekrup;
⑨ Buka diafragma bidang sedikit untuk membuat gambar poligonal menghilang di tepi bidang pandang. Pada titik ini, penyesuaian sistem pencahayaan Kühler selesai. Setelah sistem iluminasi Kühler disesuaikan, seluruh bidang pandang diterangi secara merata, dan mikrograf menjadi cerah dan jernih dengan kontras normal.
