Apa keuntungan dari mikroskop laser confocal
Dibandingkan dengan mikroskop medan lebar tradisional, mikroskop confocal pemindaian laser memiliki karakteristik definisi tinggi, resolusi tinggi, dan sensitivitas tinggi. Ini banyak digunakan di bidang biomedis dan telah menjadi alat pencitraan penting di bidang ini. Mengapa confocal bisa mendapatkan begitu banyak cinta, dan apa kelebihannya? Artikel ini mencantumkan tiga aspek untuk membahas keuntungan dari confocal.
Kumpulkan sinyal hanya pada bidang fokus, membuat gambar jelas dari buram
Jadi bagaimana mikroskop confocal mencapai keuntungan ini? Hal ini disebabkan perangkat keras confocal utama—lubang jarum, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2. Ini adalah lubang kecil di depan detektor dan ditempatkan pada bidang optik yang berkonjugasi dengan bidang fokus sampel. Ketika cahaya eksitasi menyinari sampel, bidang fokus dan bidang non-fokus area sampel akan bersemangat untuk menghasilkan sinyal fluoresensi, sesuaikan ukuran lubang jarum yang sesuai (biasanya 1 Au), sehingga sinyal fluoresensi pada bidang fokus (garis putus-putus hijau) dapat berupa sinyal Fluorescent (garis putus-putus merah dan biru) yang melewati lubang jarum untuk mencapai detektor keluar dari bidang fokus tidak dapat mencapai detektor melalui lubang jarum. Melalui penambahan lubang jarum perangkat keras, confocal dapat memperoleh gambar yang jelas dan berkualitas tinggi tanpa mengubah metode pembuatan mikroskop fluoresensi biasa.
Karena keberadaan lubang jarum, kami hanya dapat memperoleh sinyal pada bidang fokus dan memperoleh gambar dua dimensi beresolusi tinggi. Dengan menyesuaikan posisi sumbu Z secara terus-menerus, gambar dua dimensi pada posisi sumbu Z yang berbeda dapat diperoleh, dan rangkaian gambar "potongan optik" kontinu dapat diperoleh. Setelah mendapatkan irisan optik ini, modul 3D yang dilengkapi dengan perangkat lunak instrumen dapat digunakan untuk merekonstruksi gambar 3D untuk membuat gambar 3D yang jelas. Kumpulan gambar irisan optik yang non-destruktif dan berkelanjutan ini mewujudkan fungsi "CT sel".
Keakuratan hasil kolokalisasi sangat erat kaitannya dengan resolusi citra, sehingga perlu dipilih metode pencitraan beresolusi lebih tinggi saat melakukan eksperimen kolokalisasi. Dibandingkan dengan mikroskop tradisional, mikroskop confocal telah menjadi alat yang ampuh untuk penelitian kolokalisasi karena keunggulan resolusinya yang tinggi.
Karena adanya batas difraksi, resolusi optik confocal konvensional sekitar 200nm. Saat kita perlu mengamati struktur yang lebih besar dari 200nm, confocal dapat secara akurat menentukan derajat kolokalisasi. Jika analisis colocalization diperlukan, modul analisis colocalization yang dilengkapi dengan perangkat lunak confocal dapat dipilih.
