Struktur dan komponen utama mikroskop fluoresensi
(1) Sumber cahaya
Saat ini, lampu merkuri bertekanan sangat tinggi 200W umumnya digunakan sebagai sumber cahaya. Itu terbuat dari kaca kuarsa, dengan bentuk bulat di tengah dan sejumlah merkuri terisi di dalamnya. Selama pengoperasian, pelepasan muatan antara dua elektroda menyebabkan merkuri menguap, dan tekanan di dalam bola meningkat dengan cepat. Ketika merkuri menguap seluruhnya, ia dapat mencapai tekanan atmosfer standar 50-70, yang biasanya memerlukan waktu sekitar 5-15 menit. Pendaran lampu merkuri bertekanan sangat tinggi adalah hasil pelepasan antar elektroda, yang terus menerus terdisosiasi dan mereduksi molekul merkuri dan memancarkan foton. Ia memancarkan sinar ultraviolet dan biru violet yang kuat, yang cukup untuk merangsang berbagai zat fluoresen, oleh karena itu, ia banyak digunakan dalam mikroskop fluoresensi.
Lampu merkuri bertekanan sangat tinggi juga mengeluarkan energi panas dalam jumlah besar. Oleh karena itu, ruangan lampu harus memiliki kondisi pembuangan panas yang baik dan suhu lingkungan kerja tidak boleh terlalu tinggi.
Lampu merkuri bertekanan ultra tinggi yang baru tidak memerlukan tegangan tinggi untuk menyala pada tahap awal penggunaan. Setelah beberapa waktu digunakan, perlu dimulai dengan tegangan tinggi (sekitar 15000V). Setelah start, tegangan kerja umumnya dipertahankan pada 50-60V, dan arus kerja sekitar 4A. Umur rata-rata lampu merkuri bertekanan sangat tinggi 200W adalah sekitar 200 jam bila digunakan selama 2 jam setiap kali. Semakin pendek waktu pengoperasian, semakin pendek umurnya. Jika dioperasikan hanya 20 menit sekali, masa pakainya berkurang 50%. Oleh karena itu, cobalah untuk meminimalkan jumlah permulaan saat menggunakan. Efisiensi cahaya bola lampu secara bertahap menurun selama penggunaan. Setelah lampu padam, perlu menunggu hingga dingin sebelum memulai kembali. Setelah menyalakan bola lampu, sebaiknya jangan langsung dimatikan untuk menghindari penguapan merkuri yang tidak sempurna dan kerusakan pada elektroda. Umumnya perlu menunggu selama 15 menit. Karena tekanan tinggi dan radiasi ultraviolet yang kuat dari lampu merkuri bertekanan sangat tinggi, bola lampu harus ditempatkan di ruang lampu sebelum dinyalakan untuk menghindari cedera mata dan ledakan selama pengoperasian.
Rangkaian sumber cahaya lampu merkuri bertekanan sangat tinggi (100W atau 200W) dan komponennya termasuk transformasi tegangan, penekanan arus, dan penyalaan. Terdapat sistem untuk mengatur pusat cahaya bohlam di ruang lampu, dengan reflektor cekung berlapis aluminium dipasang di belakang bohlam dan lensa pengumpul cahaya dipasang di depan.
Lampu merkuri bertekanan sangat tinggi yang diproduksi di dalam negeri GCQ-200 memiliki kinerja yang baik dan dapat menggantikan bohlam impor seperti HBO-200, dengan masa pakai rata-rata lebih dari 200 jam dan harga yang relatif murah.
Perangkat sumber cahaya neon brom tungsten suhu warna tinggi sederhana dan portabel yang dikembangkan di Cina, dengan volume kecil, ringan, daya rendah, penggunaan ganda AC dan DC (dengan catu daya DC bawaan), mudah dibawa, nyaman digunakan , telah dipromosikan dan diterapkan.
(2) Sistem penyaringan warna
Sistem filter warna merupakan bagian penting dari mikroskop fluoresensi, terdiri dari pelat filter eksitasi dan pelat filter kompresi. Model pelat filter seringkali tidak konsisten antar produsen. Pelat filter umumnya diberi nama berdasarkan corak warna dasar, dengan huruf pertama mewakili corak warna, huruf kedua mewakili kaca, dan angka mewakili karakteristik model. Mikroskop Olympus
(3) Lensa objektif
Berbagai lensa objektif dapat digunakan, tetapi penggunaan lensa objektif akromatik cocok untuk fluoresensi karena kinerja fluoresensi dan transmitansinya yang sangat rendah (rentang panjang gelombang). Karena kecerahan fluoresensi gambar dalam bidang pandang mikroskop berbanding lurus dengan kuadrat rasio bukaan lensa objektif dan berbanding terbalik dengan perbesarannya, untuk meningkatkan kecerahan gambar fluoresensi, lensa objektif dengan rasio aperture yang lebih besar harus digunakan. Apalagi pada perbesaran tinggi, dampaknya sangat signifikan. Oleh karena itu, untuk spesimen dengan fluoresensi yang tidak mencukupi, lensa objektif dengan kecepatan bukaan tinggi harus digunakan, dikombinasikan dengan lensa okuler serendah mungkin (4 x, 5 x, 6,3 x, dll.).
(4) Cermin reflektif
Lapisan reflektif reflektor umumnya berlapis aluminium karena aluminium menyerap lebih sedikit sinar ultraviolet dan cahaya tampak di daerah biru-ungu, dengan pantulan lebih dari 90%, sedangkan perak hanya memantulkan 70%; Umumnya, reflektor datar digunakan.
(5) Cermin sorotan
Konsentrator yang dirancang dan dibuat khusus untuk mikroskop fluoresensi terbuat dari kaca kuarsa atau kaca lain yang mentransmisikan sinar ultraviolet. Ada dua jenis pengadu medan gelap dengan bidang pandang berbeda. Ada juga konsentrator fluoresensi diferensial.
(6) Perangkat cahaya jatuh
Perangkat cahaya jatuh jenis baru memantulkan bagian dengan panjang gelombang yang lebih pendek (ultraviolet dan ungu biru) dari sumber cahaya ke filter spektrofotometer interferensi karena sifat lapisan pada filter. Saat filter menghadap sumber cahaya dengan sudut 45 derajat. Bila dimiringkan, diarahkan secara vertikal ke arah lensa objektif dan diarahkan ke spesimen melalui lensa objektif sehingga menyebabkan spesimen tereksitasi. Pada titik ini, lensa objektif langsung bertindak sebagai kondensor. Pada saat yang sama, bagian filter yang panjang (hijau, kuning, merah, dll.) transparan terhadap filter, sehingga tidak memantulkan arah objektif. Filter bertindak sebagai pelat filter eksitasi, dan karena fluoresensi spesimen berada di wilayah panjang gelombang panjang cahaya tampak, maka dapat diamati melalui filter dan mencapai tujuan. Kecerahan gambar fluoresensi meningkat seiring dengan pembesaran, dan lebih kuat dari sumber cahaya yang ditransmisikan pada pembesaran tinggi. Selain fungsinya sebagai sumber cahaya transmisif, lebih cocok untuk pengamatan langsung pada spesimen buram dan semi transparan, seperti pelat tebal, membran filter, koloni, spesimen kultur jaringan, dll. Dalam beberapa tahun terakhir, mikroskop fluoresensi baru sering dikembangkan. menggunakan perangkat cahaya jatuh, yang dikenal sebagai mikroskop fluoresensi cahaya jatuh.
