Prinsip dan karakteristik struktural mikroskop fluoresensi
Mikroskop fluoresensi menggunakan titik dengan efisiensi bercahaya tinggi untuk memancarkan cahaya dengan panjang gelombang tertentu (seperti sinar ultraviolet 3650 in atau cahaya biru ungu 4200 in) melalui sistem filter sebagai cahaya eksitasi untuk membangkitkan zat fluoresen dalam spesimen untuk memancarkan fluoresensi dari berbagai warna Setelah itu, amati melalui perbesaran lensa objektif dan okuler. Dengan cara ini, di bawah latar belakang kontras yang kuat, meskipun fluoresensinya sangat lemah, mudah dikenali dan memiliki sensitivitas tinggi. Ini terutama digunakan untuk penelitian struktur dan fungsi sel dan komposisi kimia. Struktur dasar mikroskop fluoresensi terdiri dari mikroskop optik biasa ditambah beberapa aksesori (seperti sumber cahaya fluoresen, filter eksitasi, pembagi berkas dua warna dan filter pemblokiran, dll.). Sumber cahaya neon—umumnya menggunakan lampu merkuri bertekanan sangat tinggi (50-200W), yang dapat memancarkan cahaya dengan berbagai panjang gelombang, tetapi setiap zat fluoresen memiliki panjang gelombang eksitasi yang menghasilkan fluoresensi terkuat, sehingga filter eksitasi (Umumnya, ada filter eksitasi ultraviolet, ungu, biru dan hijau), yang hanya memungkinkan cahaya eksitasi dengan panjang gelombang tertentu melewati dan menyinari spesimen, sambil menyerap cahaya lain. Setelah setiap zat disinari oleh cahaya eksitasi, ia memancarkan fluoresensi yang terlihat dengan panjang gelombang yang lebih panjang dari panjang gelombang iradiasi dalam waktu yang sangat singkat. Fluoresensi spesifik dan umumnya lebih lemah dari cahaya eksitasi. Untuk mengamati fluoresensi tertentu, pemblokiran (atau penekanan) harus ditambahkan di belakang lensa objektif dan digunakan bersamaan dengan itu.
Perbedaan antara mikroskop fluoresensi dan mikroskop biasa
1. Metode iluminasi biasanya episkopik, yaitu sumber cahaya diproyeksikan pada sampel melalui lensa objektif;
2. Sumber cahayanya adalah sinar ultraviolet, panjang gelombangnya lebih pendek, dan resolusinya lebih tinggi dari mikroskop biasa;
3. Ada dua filter khusus, yang di depan sumber cahaya digunakan untuk menyaring cahaya tampak, dan yang di antara lensa mata dan lensa objektif digunakan untuk menyaring sinar ultraviolet untuk melindungi mata manusia.
Mikroskop fluoresensi juga merupakan jenis mikroskop optik, perbedaan utamanya adalah panjang gelombang eksitasi keduanya berbeda. Ini menentukan perbedaan antara mikroskop fluoresensi dan mikroskop optik biasa dalam hal struktur dan penggunaan.
Mikroskopi fluoresensi adalah alat penting dalam sitokimia imunofluoresen. Ini terdiri dari komponen utama seperti sumber cahaya, sistem pelat filter dan sistem optik. Itu adalah menggunakan panjang gelombang cahaya tertentu untuk membangkitkan spesimen untuk memancarkan fluoresensi, dan untuk mengamati gambar fluoresensi spesimen dengan memperkuat lensa objektif dan sistem lensa mata.
