Penggunaan dasar mikroskop medan gelap adalah sebagai berikut
1. Pasang kondensor medan gelap (atau gunakan kertas hitam tebal untuk membuat pelindung cahaya dan letakkan di bawah kondensor mikroskop biasa untuk mendapatkan efek medan gelap).
2. Pilih sumber cahaya yang kuat, biasanya dengan cahaya mikroskop untuk mencegah cahaya langsung masuk ke lensa objektif.
3. Tambahkan setetes minyak cedar di antara kondensor dan kaca objek untuk menghindari pantulan total dari cahaya yang menyinari kondensor, gagal mencapai objek yang akan diperiksa dan iluminasi medan gelap.
4. Lakukan penyetelan tengah, yaitu gerakkan kondensor secara horizontal sehingga sumbu optik kondensor dan sumbu optik mikroskop benar-benar pada garis lurus. Angkat dan turunkan kondensor, sejajarkan titik fokus kondensor (puncak balok kerucut pada Gambar 1-2) dengan objek yang akan diuji.
5. Pilih lensa objektif yang sesuai dengan kondensor, sesuaikan panjang fokus, dan operasikan sesuai dengan metode mikroskop biasa.
