Parameter teknis dan keterampilan penggunaan mikroskop fluoresensi
Parameter teknis mikroskop fluoresensi 1. Lensa okuler sudut lebar 2. Lensa objektif akromatik 3. Konverter lensa objektif empat lubang 4. Perangkat fluoresensi jatuh Sistem eksitasi Biru (B) Hijau (G) 10Lampu merkuri 0W 5. Kasar koaksial mekanisme pemfokusan mikro: rentang pemfokusan 15mm Nilai kisi mikro 0,002mm 6. Rentang gerakan longitudinal meja kerja mekanis lapisan ganda: 70mm Rentang gerakan lateral: 50mm
Parameter teknis mikroskop fluoresensi
1. Lensa mata sudut lebar
2. Lensa objektif achromatic
3. Konverter lensa objektif empat lubang
4. Perangkat Fluoresensi Jatuh Biru (B) Hijau (G) Sistem Eksitasi Lampu Merkuri 100W
Mekanisme pemfokusan mikro kasar koaksial: rentang pemfokusan: 15mm, nilai kisi mikro: 0.002mm
6. Meja kerja mekanis lapisan ganda
Rentang gerakan longitudinal: 70 mm Rentang gerakan lateral: 50 mm
Tip dan metode untuk menggunakan mikroskop fluoresensi
（1） Geser
Ketebalan slide harus antara 0,8 dan 1,2 mm. Jika slide terlalu tebal, di satu sisi akan menyerap terlalu banyak cahaya, dan di sisi lain, tidak dapat menyebabkan cahaya eksitasi berkumpul pada spesimen. Slide harus halus dan bersih, dengan ketebalan yang seragam, dan tanpa fluoresensi spontan yang signifikan. Terkadang slide kaca kuarsa dibutuhkan.
（2） Kaca penutup
Ketebalan kaca penutup sekitar 0.17mm, dan halus serta bersih. Untuk meningkatkan eksitasi, kaca penutup interferensi juga dapat digunakan. Ini adalah kaca penutup khusus yang dilapisi dengan beberapa lapisan zat (seperti magnesium fluorida) yang memiliki efek interferensi berbeda pada panjang gelombang cahaya yang berbeda. Ini dapat memungkinkan fluoresensi untuk lewat dengan lancar, sambil memantulkan eksitasi, yang dapat merangsang sampel.
（3） Spesimen
Bagian jaringan atau spesimen lain tidak boleh terlalu tebal. Misalnya, jika terlalu tebal, sebagian besar cahaya eksitasi dikonsumsi di bagian bawah spesimen, sedangkan bagian atas yang diamati langsung oleh lensa objektif tidak cukup tereksitasi. Selain itu, tumpang tindih sel atau penyamaran ketidakmurnian dapat memengaruhi penilaian.
（4） Agen pemasangan
Gliserin umumnya digunakan sebagai agen pemasangan, dan harus bebas dari fluoresensi spontan, tidak berwarna dan transparan. Kecerahan fluoresensi lebih terang pada pH 8,5 hingga 9,5, dan tidak mudah pudar dengan cepat. Oleh karena itu, campuran ekuivalen gliserol dan 0,5 mol/l larutan buffer karbonat dengan pH 9.0 hingga 9,5 biasanya digunakan sebagai zat pengikat.
（5） Minyak cermin
Umumnya, ketika menggunakan mikroskop fluoresensi medan gelap dan mikroskop minyak untuk mengamati spesimen, perlu menggunakan minyak lensa. Yang terbaik adalah menggunakan oli lensa khusus non fluoresen, yang juga dapat diganti dengan gliserol yang disebutkan di atas. Parafin cair juga dapat digunakan, tetapi indeks biasnya rendah, yang berdampak kecil pada kualitas gambar.
