Mikroskopi - Deskripsi Fungsi Struktur
lensa objektif
Lensa objektif adalah bagian optik mikroskop untuk pencitraan pertama, yang terdiri dari beberapa kelompok lensa yang direkatkan. Panjang fokus adalah total panjang fokus kelompok lensa.
Bergantung pada tingkat koreksi untuk chromatic aberrations, aberrations, field curvature, dll., dan karakteristik kepemilikannya, ada beberapa jenis tujuan: (plan) tujuan achromatic, (plan) tujuan apochromat, super-plan dan tujuan khusus, dll. .
Penyimpangan kromatik: Perbedaan warna dalam pencitraan sumber cahaya tampak (cahaya polikromatik). Titik objek berwarna putih tidak dapat membentuk titik bayangan putih, melainkan titik bayangan berwarna.
Penyimpangan: titik difus (lingkaran kebingungan) yang terbentuk pada bidang gambar setelah berkas cahaya yang dipancarkan oleh titik objek di luar sumbu optik dibiaskan oleh sistem optik.
Aberasi koma: Kesalahan pencitraan asimetris seperti komet setelah berkas cahaya yang dipancarkan oleh titik objek di luar sumbu optik dibiaskan oleh sistem optik.
Lensa objektif achromatic lensa objektif achromatic: lensa objektif biasa, ditandai dengan "Ach" pada cangkangnya. Terutama memperbaiki chromatic aberration (merah, biru), spherical aberration (kuning, hijau) dan koma pencitraan sumbu optik. Kelengkungan bidangnya besar.
Lensa objektif apokromatik lensa objektif apokromatik: lensa objektif bermutu tinggi dengan struktur yang presisi dan kompleks, terbuat dari kaca khusus seperti fluorit, dan ditandai dengan "Apo" pada cangkangnya. Berdasarkan lensa objektif akromatik, ia juga perlu mengoreksi spektrum sekunder, aberasi merah, hijau, dan biru, serta aberasi sferis merah dan biru. Lensa objektif apokromatik memiliki koreksi aberasi yang sempurna, apertur numerik yang lebih besar, resolusi yang lebih tinggi, perbesaran efektif yang lebih tinggi, dan kualitas gambar yang unggul.
Lensa objektif semi apokromatik: biaya kinerja dan kualitas pencitraan antara lensa objektif akromatik dan lensa objektif apokromatik, juga dikenal sebagai lensa objektif fluorspar (fluorit), ditandai dengan "FL". Aberasi kromatik dan sferis aberasi merah dan biru dapat dikoreksi.
Tujuan rencana: Ini terutama mengoreksi cacat kelengkungan bidang, sehingga bidang pandangnya rata, pencitraannya realistis, dan pengamatannya nyaman. Ini adalah lensa belakang setengah lingkaran yang ditambahkan ke unit lensa objektif. Itu juga dapat digabungkan dalam tujuan achromat, tujuan apochromat.
Lensa objektif khusus: Berdasarkan lensa objektif di atas, lensa objektif dirancang dan diproduksi untuk mencapai efek observasi khusus.
lensa mata
Lensa okuler memperbesar bayangan nyata lensa objektif, yang merupakan perbesaran bayangan antara dan termasuk perbesaran kedua. Struktur lensa okuler relatif sederhana, terdiri dari beberapa lensa dalam beberapa kelompok. Titik di mana sinar cahaya melewati lensa mata berpotongan di atas disebut titik mata, yang merupakan posisi terbaik untuk pengamatan pencitraan.
Lensa mata memiliki berbagai konfigurasi perbesaran, 10X adalah yang paling umum digunakan; 5X memiliki kemampuan reduksi pencitraan yang lebih tinggi, tetapi perbesarannya relatif kecil; Lensa mata 20X memiliki perbesaran terbesar, tetapi kejernihan gambar berkurang. Itu perlu dipilih sesuai dengan kebutuhan aktual.
Kondensator
Kondensor digunakan untuk menutupi kekurangan cahaya, dengan tepat mengubah sifat cahaya dari sumber cahaya, memfokuskan sampel, dan meningkatkan iluminasi. Itu terletak di bawah panggung dan harus bekerja sama dengannya saat menggunakan lensa objektif NA Lebih besar dari atau sama dengan 0.40. Ini memiliki berbagai struktur, dan lubang numerik yang berbeda dari lensa objektif memiliki persyaratan yang berbeda untuk kondensor.
1. Kondensor Abbe (Kondensor Abbe): Kondensor Abbe terdiri dari dua lensa, yang memiliki kemampuan pengumpulan cahaya yang lebih baik. Ketika NA lensa objektif mikroskop biasa lebih besar dari atau sama dengan 0.60, koreksi aberasi kromatik dan aberasi sferis tidak lengkap, dan perlu digunakan bersama.
2. Kondensor aplanatik akromatik: Kondensor akromatik terdiri dari serangkaian lensa, yang dapat mengoreksi aberasi kromatik dan aberasi bola untuk mendapatkan pencitraan yang memuaskan. Ini adalah yang terbaik dalam pengamatan lapangan terang. Dilengkapi dengan mikroskop canggih dan lensa objektif pembesaran rendah tidak berlaku.
3. Kondensor lain mengacu pada kondensor yang digunakan untuk tujuan selain medan terang yang disebutkan di atas, seperti kondensor medan gelap, kondensor fase kontras, kondensor polarisasi, kondensor interferensi diferensial, dll.
metode pencahayaan
Metode iluminasi mikroskop dibagi menjadi dua kategori: iluminasi yang ditransmisikan dan iluminasi epi menurut posisi sumber cahaya dan arah pancaran.
1. Penerangan yang ditransmisikan (penerangan transparan) Penerangan yang ditransmisikan cocok untuk sampel transparan atau tembus cahaya, dan sebagian besar mikroskop biologis termasuk dalam jenis penerangan ini. Diantaranya, ada dua bentuk pencahayaan tengah dan pencahayaan miring.
(1) Penerangan sentral berarti bahwa sumbu pusat berkas iluminasi dan sumbu optik mikroskop berada pada garis lurus yang sama, yang merupakan metode iluminasi transmisif yang paling umum digunakan. Metode ini dibagi menjadi pencahayaan kritis dan pencahayaan Kohler.
1) Penerangan kritis, metode penerangan umum. Keuntungan: Sinar sumber cahaya dicitrakan oleh kondensor dan disinari pada sampel, dan sinarnya sempit dan kuat. Cacat: Gambar filamen dari sumber cahaya bertepatan dengan bidang sampel, iluminasi pencitraan tidak merata, dan ada perbedaan antara terang dan gelap. Eliminasi: Tempatkan filter warna penyerap panas putih susu di depan sumber cahaya untuk membuat pencahayaan lebih seragam, atau ganti sumber cahaya LED.
2) Iluminasi Kohler, dinamai untuk menghormati "pencitraan sekunder" yang ditemukan oleh para insinyur Zeiss. Ini mengatasi kekurangan pencahayaan kritis, memiliki efek pencitraan yang baik dan fotomikrograf yang baik. Fitur utamanya adalah: setelah filamen sumber cahaya melewati kondensor dan diafragma variabel bidang pandang, gambar filamen jatuh pada bidang bukaan kondensor untuk pertama kalinya, dan kondensor membentuk gambar filamen kedua di bidang fokus belakang sana. Fokus termal tidak lagi pada bidang sampel, dan sampel dapat diamati dengan iluminasi jangka panjang.
(2) iluminasi miring (oblique illumination), sumbu pusat sinar tidak bertepatan dengan sumbu optik mikroskop, dan sampel diterangi secara miring pada sudut tertentu. Ini biasanya digunakan dalam kontras fase, medan gelap, dan mikroskop stereo.
2. Penerangan insiden: Penerangan insiden juga disebut penerangan reflektif. Sumber cahaya berada di atas sampel, dan berkas cahaya jatuh pada sampel setelah melewati lensa objektif. Lensa objektif bertindak sebagai kondensor dan cocok untuk sampel yang tidak transparan. Mikroskop fluoresensi, stereoskopis, terbalik, dan confocal menggunakan iluminasi ini.
Penyesuaian sumbu optik
Dalam sistem optik mikroskop, sumbu optik sumber cahaya, lensa kondensor, lensa objektif, dan lensa okuler serta bagian tengah diafragma harus bertepatan dengan sumbu optik mikroskop, dan penyesuaian sumbu optik sebelum digunakan tidak dapat diabaikan .
1. Penyesuaian pusat kondensor Penyesuaian pusat kondensor adalah fokus penyesuaian sumbu optik mikroskop. Metode: pertama-tama kurangi diafragma lapangan dan amati dengan lensa objektif 10x. Jika gambar kontur diafragma tidak berada di tengah, sesuaikan kedua sekrup di bagian luar kondensor untuk menyesuaikannya ke tengah; lalu naikkan diafragma bidang secara perlahan hingga gambar kontur sejajar dengan bagian tengah. Tepi bidang pandang bertepatan, menunjukkan bahwa keduanya sudah koaksial, dan lebih baik menggunakan yang sedikit lebih besar.
2. Penyesuaian Diafragma Bukaan Diafragma bukaan dipasang di kondensor. Ada tanda skala di tepi luar kondensor mikroskop tingkat penelitian, yang nyaman untuk menyesuaikan kondensor agar sesuai dengan bukaan numerik lensa objektif. Perlu disesuaikan secara sinkron saat mengganti lensa objektif.
