Metode persiapan sampel untuk mikroskop optik dan elektron film
Metode mikrofilm umumnya mencakup empat kategori: metode pemotongan, metode penyegelan keseluruhan, metode pelapisan dan metode pengepresan.
①Metode irisan. Ketebalan irisan mikroskop optik antara 2 hingga 25 mikron, bahan tumbuhan dan hewan secara umum, ketebalan irisan sekitar 10 mikron sudah sesuai. Metode pembagian bervariasi menurut agen penyematan yang berbeda. Yang umum digunakan adalah metode pemotongan parafin, metode pemotongan lem kapas, metode pemotongan beku, dan metode glikol metakrilat (disebut metode GMA). Metode pemotongan parafin meliputi tahapan fiksasi, penyisipan, pemotongan, pewarnaan, dehidrasi dan penyegelan. Kuncinya adalah dengan menanamkan biomaterial ke dalam lilin parafin, dan menggunakan lilin parafin sebagai pendukung untuk memotong biomaterial yang direndam dalam blok lilin menjadi irisan tipis yang ideal. Proses pengoperasiannya adalah sebagai berikut: fiksasi → pencucian air → langkah demi langkah dari dehidrasi alkohol konsentrasi rendah ke tinggi → transparansi xilena → perendaman lilin → penyematan → pemotongan → penambalan → dewaxing xilena → langkah demi langkah dari konsentrasi tinggi ke rendah pengolahan alkohol, dan akhirnya beralih ke air → pewarnaan → selangkah demi selangkah dari dehidrasi alkohol konsentrasi rendah ke tinggi → transparansi xilena → penyegelan dengan perekat resin. Langkah-langkah dasar yang terlibat adalah sama dalam semua jenis teknik pembuatan film.
② Metode penyegelan integral. Digunakan untuk sel tunggal, organisme kecil atau organ tersebar dari metode film terpasang keseluruhan. Metode ini juga memerlukan berbagai tahapan fiksasi, pewarnaan, dehidrasi, transparansi dan penyegelan. Metode ini digunakan untuk persiapan bagian mulut sayap renda dan serangga.
Metode olesan. Suatu metode preparasi dimana spesimen biologi yang mudah tersebar dilapisi pada kaca objek. Noda darah adalah contohnya.
④Metode penekanan. Jaringan alami yang mudah tersebar atau jaringan yang mudah tersebar setelah perawatan, seperti spermatosit hewan, sel ujung akar, dll. pada kaca objek, ditambah kaca penutup, kemudian jaringan tersebut dihancurkan dengan paksa, sehingga sel atau struktur intraseluler menyebar ke dalam satu lapisan. metode pembuatan film. Metode press yang sering digunakan untuk mengamati kromosom, biasanya diwarnai dengan warna magenta asetat, lichen red dan carbolic acid red.
