Pengenalan beberapa pengetahuan tentang mikroskop optik
Alat atau perangkat yang memperbesar objek kecil atau bagian kecil dari objek dengan perbesaran tinggi untuk pengamatan. Ini banyak digunakan dalam produksi industri dan pertanian dan penelitian ilmiah. Ahli biologi dan pekerja medis juga banyak menggunakan mikroskop dalam bisnis mereka. Secara luas dibagi menjadi mikroskop optik dan mikroskop elektron.
Mikroskop optik adalah mikroskop yang menggunakan cahaya tampak sebagai sumber cahaya. Mikroskop optik biasa dapat dibagi menjadi dua bagian: sistem optik dan perangkat mekanis. Sistem optik terutama mencakup lensa mata, lensa objektif, kondensor, diafragma, dan sumber cahaya. Perangkat mekanis terutama mencakup laras lensa, kolom cermin, panggung, dasar cermin, sekrup penyesuaian ketebalan dan bagian lainnya (Gambar 1). Prinsip optik dasarnya ditunjukkan pada Gambar 2. Lensa cembung kecil di sebelah kiri gambar mewakili sekelompok lensa dengan panjang fokus pendek, yang disebut lensa objektif. Lensa cembung besar di sebelah kanan mewakili sekelompok lensa dengan panjang fokus yang panjang, yang disebut lensa okuler. Benda yang akan diamati (AB) diletakkan sedikit di luar titik fokus (f1) lensa objektif. Cahaya dari benda membentuk bayangan nyata yang diperbesar terbalik (B'A') sedikit di dalam fokus okuler (f2) setelah melewati lensa objektif. Mata pengamat selanjutnya memperbesar bayangan nyata (B'A') menjadi bayangan maya terbalik (B'A') melalui lensa okuler.
Lensa mata terletak di atas laras mikroskop dan umumnya terdiri dari dua lensa cembung. Selain memperluas bayangan nyata yang dibentuk oleh lensa objektif, hal itu juga membatasi bidang pandang yang diamati oleh mata. Menurut perbesarannya, ada tiga jenis lensa mata yang umum digunakan: 5 kali, 10 kali, dan 15 kali.
Lensa objektif umumnya terletak di bawah laras mikroskop, dekat dengan objek yang diamati. Ini terdiri dari 8 hingga 10 lensa. Fungsinya untuk memperbesar (membuat gambar nyata yang diperbesar untuk objek), yang kedua untuk memastikan kualitas gambar, dan yang ketiga untuk meningkatkan resolusi. Lensa objektif yang umum digunakan dapat dibagi menjadi pembesaran rendah (4×), pembesaran sedang (10× atau 20×), pembesaran tinggi (40×) dan lensa objektif perendaman minyak (100×) menurut pembesaran. Beberapa lensa objektif dipasang pada roda pengubah cermin, dan lensa objektif dengan kelipatan berbeda dapat dipilih dengan memutar meja putar sesuai kebutuhan.
Perbesaran mikroskop adalah kelipatan okuler dikalikan objektif. Misalnya lensa okuler 10 kali dan lensa objektif 40 kali, maka perbesarannya 40×10 kali (perbesaran 400 kali). Mikroskop yang baik dapat memperbesar 2000 kali dan dapat membedakan dua titik dengan jarak 1×10-5cm.
Ketika cahaya putih melewati lensa cembung, cahaya dengan panjang gelombang lebih pendek (biru-ungu) memiliki pembiasan yang lebih besar daripada cahaya dengan panjang gelombang panjang (merah-oranye). Oleh karena itu, saat pencitraan, terdapat berbagai spektrum di sekitar gambar, dan terdapat lingkaran cahaya biru atau merah. Cacat warna ini disebut chromatic aberration. Karena sudut berbeda di mana cahaya masuk (dan keluar) berbagai bagian permukaan lensa, cahaya yang melewati pinggiran lensa dibiaskan pada sudut yang lebih besar daripada cahaya yang melewati bagian tengah lensa. Oleh karena itu, gambar buram dan terdistorsi muncul di sekitar lingkar gambar selama pencitraan. Cacat kelengkungan permukaan pencitraan ini disebut aberasi bola. Serangkaian grup lensa cembung dan cekung dengan berbagai bentuk, struktur, dan jarak bekerja sama satu sama lain untuk mengoreksi aberasi kromatik dan aberasi sferis secara maksimal, membentuk gambar yang cerah, jernih, dan akurat. Inilah sebabnya lensa okuler atau lensa objektif terdiri dari satu set lensa masing-masing. Lensa semacam itu disebut plan achromats.
Ketika cahaya diproyeksikan dari satu medium (seperti udara) ke medium lain yang lebih padat (seperti kaca), ia akan membelok ke "garis normal" (garis yang tegak lurus dengan antarmuka medium), seperti garis BOA pada Gambar. 3. Ketika cahaya masuk dari medium rapat (kaca) ke medium tidak rapat (udara), cahaya akan menyimpang dari “garis normal”, seperti garis AOB (Gambar 3a). Ketika cahaya melewati kaca kondensor (indeks bias 1,51) dan memasuki udara, ia juga akan menyimpang dan membias ke luar, sehingga jumlah cahaya yang masuk ke lensa objektif sangat berkurang, dan resolusi gambar juga berkurang. Saat menggunakan lensa objektif 100x, jika oli diisi antara lensa objektif dan kaca penutup (indeks bias juga 1,51) untuk mengisolasi udara, cahaya dapat masuk ke lensa objektif hampir tanpa pembiasan, yang meningkatkan kecerahan dan resolusi lensa objektif. foto . Sasaran seperti itu disebut sasaran perendaman minyak (Gambar 3b).
Kondensor terletak di bawah panggung mikroskop, yang dapat menyatukan cahaya dari sumber cahaya, memusatkan cahaya pada spesimen, dan membuat spesimen disinari secara merata dengan intensitas cahaya sedang. Ujung bawah kondensor dilengkapi dengan penghenti bukaan (diafragma) untuk mengontrol ketebalan balok.
Sumber penerangan mikroskop optik biasa terletak di bawah kondensor, yang merupakan bola lampu kuat khusus dengan penerangan seragam, dan dilengkapi dengan resistor variabel untuk mengubah intensitas cahaya.
Karena cahaya sumber cahaya mikroskop optik biasa mentransmisikan dari bagian bawah badan lensa, melewati lensa kondensor, lensa objektif, dan mencapai lensa mata, sampel yang akan diamati harus dipotong menjadi irisan tipis dengan ketebalan sekitar 6 μm yang dapat mentransmisikan cahaya dalam penelitian medis dan biologi. Dan pewarnaan untuk menunjukkan jaringan dan sel yang berbeda dan struktur halus lainnya. Seluruh proses pengolahan disebut teknik irisan jaringan konvensional, termasuk pemilihan bahan jaringan yang sesuai, fiksasi dengan larutan formaldehida (formalin), dehidrasi dengan alkohol langkah demi langkah, penyisipan dalam parafin, pemotongan jaringan menjadi irisan tipis dengan mikrotom dan pemasangannya. pada slide kaca, dan kemudian Setelah pewarnaan dengan pewarna hematoxylin-eosin, slide jaringan akhirnya dipasang di lem resin optik. Slide jaringan yang telah disiapkan dapat disimpan untuk waktu yang lama.
Lensa mata dan lensa objektif mikroskop dipasang di kedua ujung laras lensa, dan jaraknya tetap. Tempatkan slide tisu di atas panggung, dan putar sekrup penyesuaian kasar untuk mendekatkan panggung ke lensa objektif. Irisan jaringan memasuki bidang fokus lensa objektif, dan gambaran jaringan pada spesimen dapat dilihat pada lensa okuler. Kemudian gunakan sekrup penyetelan halus agar gambar di lensa mata jelas untuk diamati. Saat mengubah perbesaran, lensa okuler atau lensa objektif harus diganti.
