Pengantar mikroskop optik umum
Mikroskop adalah alat utama untuk mengamati sel. Menurut sumber cahaya yang berbeda, mereka dapat dibagi menjadi dua kategori: mikroskop optik dan mikroskop elektron. Yang pertama menggunakan cahaya tampak (mikroskop UV menggunakan sinar ultraviolet) sebagai sumber cahaya, sedangkan yang kedua menggunakan berkas elektron sebagai sumber cahaya. Mikroskop optik biasa dan mikroskop laser confocal keduanya merupakan mikroskop optik.
Mikroskop biologi biasa terdiri dari tiga bagian, yaitu: ① sistem penerangan, termasuk sumber cahaya dan kondensor; ② sistem perbesaran optik, terdiri dari lensa objektif dan lensa okuler, yang merupakan bagian utama mikroskop. Untuk menghilangkan aberasi bola dan aberasi kromatik, baik lensa okuler maupun lensa objektif terdiri dari kelompok lensa yang kompleks; ③ alat mekanis, digunakan untuk memperbaiki bahan dan memudahkan observasi.
Jelas tidaknya suatu gambar mikroskop tidak hanya bergantung pada perbesarannya, tetapi juga pada resolusi mikroskop. Resolusi mengacu pada kemampuan mikroskop (atau mata manusia yang berjarak 25cm dari sasaran) untuk membedakan jarak terkecil antar benda. Besar kecilnya resolusi ditentukan Berdasarkan panjang gelombang cahaya, perbandingan bukaan lensa dan indeks bias medium, rumusnya dinyatakan sebagai:
R=0.61λ/NANA =ｎsin /2
Dalam rumusnya: n=indeks bias medium; =sudut bukaan cermin (sudut bukaan spesimen terhadap bukaan lensa objektif), NA=bukaan numerik. Sudut cermin selalu kurang dari 180 derajat, sehingga nilai maksimum sina/2 harus kurang dari 1.
Indeks bias kaca yang digunakan untuk membuat lensa optik adalah 1,65~1,78. Semakin dekat indeks bias media yang digunakan dengan indeks bias kaca, semakin baik. Untuk lensa objektif kering, medianya adalah udara, dan rasio bukaan lensa umumnya 0.05~0,95; untuk lensa minyak, minyak cedar digunakan sebagai medianya, dan rasio pembukaan lensa bisa mendekati 1,5.
Panjang gelombang cahaya biasa adalah 400~700nm, sehingga nilai resolusi mikroskop tidak boleh kurang dari 0,2μm. Resolusi mata manusia adalah 0,2 mm, sehingga perbesaran maksimum desain mikroskop umum biasanya 1000X.
