Parameter teknis optik penting dari mikroskop
Dalam pemeriksaan mikroskopis, orang selalu berharap untuk memiliki gambar ideal yang jelas dan cerah, yang membutuhkan parameter teknis optik mikroskop untuk memenuhi standar tertentu, dan mengharuskan saat menggunakannya, harus dikoordinasikan sesuai dengan tujuan pemeriksaan mikroskopis dan situasi aktual Hubungan antara parameter. Hanya dengan cara ini kami dapat memberikan kinerja penuh dari mikroskop dan mendapatkan hasil pemeriksaan mikroskopis yang memuaskan.
Parameter teknis optik mikroskop meliputi: apertur numerik, resolusi, perbesaran, kedalaman fokus, lebar bidang pandang, cakupan yang buruk, jarak kerja, dll. Parameter ini tidak semuanya lebih tinggi lebih baik, mereka saling terkait dan membatasi satu sama lain. lainnya, saat menggunakan, hubungan antara parameter harus dikoordinasikan sesuai dengan tujuan pemeriksaan mikroskop dan situasi sebenarnya, namun resolusi harus berlaku.
1. Bukaan numerik
Bukaan numerik disingkat NA. Bukaan numerik adalah parameter teknis utama lensa objektif dan lensa kondensor, dan merupakan simbol penting untuk menilai kinerja keduanya (terutama untuk lensa objektif). Ukuran nilai numeriknya masing-masing ditandai pada casing lensa objektif dan lensa kondensor.
Bukaan numerik (NA) adalah produk dari indeks bias (n) medium antara lensa depan lensa objektif dan objek yang akan diperiksa dan sinus dari setengah sudut bukaan (u). Rumusnya adalah sebagai berikut: NA=nsinu/2
Sudut bukaan, juga dikenal sebagai "sudut mulut cermin", adalah sudut yang dibentuk oleh titik objek pada sumbu optik lensa objektif dan diameter efektif lensa depan lensa objektif. Semakin besar sudut apertur, semakin besar fluks cahaya yang memasuki lensa objektif, yang sebanding dengan diameter efektif lensa objektif dan berbanding terbalik dengan jarak titik fokus.
Saat mengamati dengan mikroskop, jika ingin memperbesar nilai NA, sudut bukaan tidak bisa diperbesar. Satu-satunya cara adalah dengan meningkatkan nilai indeks bias n medium. Berdasarkan prinsip ini, dihasilkan lensa objektif celup air dan lensa objektif celup minyak. Karena nilai indeks bias n media lebih besar dari 1, nilai NA bisa lebih besar dari 1.
Bukaan numerik maksimum adalah 1,4, yang telah mencapai batas baik secara teoritis maupun teknis. Saat ini bromonaftalena dengan indeks bias tinggi digunakan sebagai media. Indeks bias bromonaftalena adalah 1,66, sehingga nilai NA bisa lebih besar dari 1,4.
Harus ditunjukkan di sini bahwa untuk memberikan peran penuh pada bukaan numerik lensa objektif, nilai NA lensa kondensor harus sama atau sedikit lebih besar daripada lensa objektif selama pengamatan.
Bukaan numerik terkait erat dengan parameter teknis lainnya, dan hampir menentukan dan memengaruhi parameter teknis lainnya. Ini sebanding dengan resolusi, sebanding dengan perbesaran, dan berbanding terbalik dengan kedalaman fokus. Saat nilai NA meningkat, lebar bidang pandang dan jarak kerja akan berkurang.
2. resolusi
Resolusi mikroskop mengacu pada jarak minimum antara dua titik objek yang dapat dibedakan dengan jelas oleh mikroskop, juga dikenal sebagai "tingkat diskriminasi". Rumus perhitungannya adalah σ=λ/NA
Dimana σ adalah jarak resolusi minimum; λ adalah panjang gelombang cahaya; NA adalah bukaan numerik lensa objektif. Resolusi lensa objektif tampak ditentukan oleh dua faktor: nilai NA lensa objektif dan panjang gelombang sumber iluminasi. Semakin besar nilai NA, semakin pendek panjang gelombang cahaya iluminasi, dan semakin kecil nilai σ, semakin tinggi resolusinya.
Untuk meningkatkan resolusi, yaitu mengurangi nilai σ, langkah-langkah berikut dapat diambil
(1) Kurangi nilai panjang gelombang λ dan gunakan sumber cahaya dengan panjang gelombang pendek.
(2) Tingkatkan nilai n menengah untuk meningkatkan nilai NA (NA=nsinu/2).
(3) Tingkatkan nilai sudut apertur u untuk meningkatkan nilai NA.
(4) Tingkatkan kontras antara terang dan gelap.
