Perbedaan Mikroskop Fluoresensi dengan Mikroskop Laser Confocal
Mikroskop fluoresensi
1. Mikroskop fluoresensi menggunakan sinar ultraviolet sebagai sumber cahaya untuk menerangi benda yang diperiksa hingga memancarkan fluoresensi, kemudian mengamati bentuk dan letak benda tersebut di bawah mikroskop. Mikroskop fluoresensi digunakan untuk mempelajari penyerapan dan pengangkutan zat di dalam sel, serta distribusi dan posisi zat kimia. Beberapa zat dalam sel, seperti klorofil, dapat berpendar setelah disinari sinar ultraviolet; beberapa zat sendiri tidak dapat berfluoresensi, tetapi jika diwarnai dengan pewarna fluoresen atau antibodi fluoresen, zat tersebut dapat berfluoresensi setelah disinari dengan sinar ultraviolet. Mikroskop fluoresensi adalah salah satu alat untuk penelitian kualitatif dan kuantitatif terhadap zat tersebut.
2. Prinsip mikroskop fluoresensi:
(A) Sumber cahaya: Sumber cahaya memancarkan cahaya dengan berbagai panjang gelombang (dari ultraviolet hingga inframerah).
(B) Sumber cahaya filter eksitasi: mentransmisikan cahaya dengan panjang gelombang tertentu yang dapat menyebabkan spesimen berfluoresensi, sekaligus menghalangi cahaya yang tidak berguna untuk merangsang fluoresensi.
(C) Spesimen berpendar: Umumnya diwarnai dengan pigmen berpendar.
(D) Filter pemblokiran: Memblokir cahaya eksitasi yang tidak diserap oleh spesimen dan secara selektif mentransmisikan fluoresensi. Beberapa panjang gelombang dalam fluoresensi juga ditransmisikan secara selektif. Mikroskop yang menggunakan sinar ultraviolet sebagai sumber cahaya untuk menyebabkan objek yang disinari menjadi berpendar. Mikroskop elektron pertama kali dirakit pada tahun 1931 di Berlin, Jerman oleh Knorr dan Hallowska. Mikroskop ini menggunakan berkas elektron berkecepatan tinggi, bukan berkas cahaya. Karena panjang gelombang aliran elektron jauh lebih pendek dibandingkan cahaya, perbesaran mikroskop elektron dapat mencapai 800,000 kali, dan batas resolusi minimum adalah 0,2 nanometer. Mikroskop elektron pemindai, yang mulai digunakan pada tahun 1963, memungkinkan orang melihat struktur kecil di permukaan benda.
3. Ruang lingkup aplikasi: Digunakan untuk memperbesar gambar benda kecil. Umumnya digunakan dalam pengamatan biologi, kedokteran, partikel mikroskopis, dll.
mikroskop konfokal
1. Mikroskop confocal menambahkan semi-lensa semi-reflektif ke jalur optik cahaya yang dipantulkan, yang membiaskan cahaya pantulan yang melewati lensa ke arah lain. Terdapat penyekat dengan lubang jarum di fokusnya, dan lubang jarum tersebut terletak. Di titik fokus, di belakang penyekat, terdapat tabung pengganda foto. Dapat dibayangkan bahwa cahaya yang dipantulkan sebelum dan sesudah fokus cahaya deteksi melewati sistem confocal ini dan tidak dapat difokuskan pada lubang kecil tersebut, serta akan terhalang oleh penyekat. Jadi yang diukur oleh fotometer adalah intensitas cahaya yang dipantulkan pada fokusnya.
2. Prinsip: Mikroskop optik tradisional menggunakan sumber cahaya lapangan, dan gambar setiap titik pada spesimen akan terganggu oleh difraksi atau cahaya yang tersebar dari titik-titik yang berdekatan; mikroskop confocal pemindaian laser menggunakan sinar laser untuk membentuk sumber cahaya titik melalui lubang kecil yang menerangi untuk menerangi bagian dalam spesimen. Setiap titik bidang fokus dipindai, dan titik iluminasi pada spesimen dicitrakan pada lubang jarum pendeteksi, yang diterima titik demi titik atau garis demi garis oleh tabung pengganda foto (PMT) atau perangkat kopling dingin (cCCD) di belakang pendeteksian. lubang jarum, dan dengan cepat Gambar berpendar terbentuk di layar monitor komputer. Lubang jarum iluminasi dan lubang jarum pendeteksi berkonjugasi relatif terhadap bidang fokus lensa objektif. Titik-titik pada bidang fokus difokuskan pada lubang jarum iluminasi dan lubang jarum emisi secara bersamaan. Titik di luar bidang fokus tidak akan dicitrakan pada lubang jarum pendeteksi. Hal ini diperoleh gambar Confocal merupakan penampang optik spesimen, mengatasi kekurangan gambar buram pada mikroskop biasa.
3. Bidang aplikasi: Melibatkan kedokteran, penelitian ilmiah hewan dan tumbuhan, biokimia, bakteriologi, biologi sel, embriologi jaringan, ilmu pangan, genetika, farmakologi, fisiologi, optik, patologi, botani, ilmu saraf, biologi kelautan, dan ilmu material, ilmu elektronik , mekanika, geologi perminyakan, mineralogi.
