Prinsip mikroskop fluoresensi dan fitur struktural
Mikroskop fluoresensi adalah penggunaan titik dengan efisiensi pendaran yang tinggi, melalui penyaringan sistem warna untuk memancarkan panjang gelombang cahaya tertentu (seperti ultraviolet 3650 ke dalam atau ungu-biru 4200 ke dalam) sebagai cahaya eksitasi, eksitasi bahan fluoresen dalam spesimen memancarkan berbagai warna fluoresensi yang berbeda, dan kemudian diperbesar melalui objektif dan lensa okuler untuk observasi. Dengan cara ini, dalam latar belakang kontras yang kuat, meskipun fluoresensinya sangat lemah, mudah dikenali, sensitivitasnya tinggi, terutama digunakan untuk mempelajari struktur dan fungsi sel serta komposisi kimia. Struktur dasar mikroskop fluoresensi terdiri dari mikroskop optik biasa ditambah beberapa aksesori (seperti sumber cahaya fluoresensi, filter eksitasi, pemisah berkas dua warna dan filter pemblokiran, dll.). Sumber cahaya fluoresen - umumnya menggunakan lampu merkuri bertekanan sangat tinggi (50-200W), yang dapat memancarkan berbagai panjang gelombang cahaya, namun setiap bahan fluoresen memiliki panjang gelombang eksitasi fluoresensi terkuat, sehingga perlu ditambahkan filter eksitasi (umumnya filter eksitasi ultraviolet, ungu, biru dan hijau), sehingga hanya cahaya eksitasi dengan panjang gelombang tertentu yang melalui penyinaran spesimen, sedangkan cahaya lainnya diserap. Sehingga perlu ditambahkan filter eksitasi (biasanya filter eksitasi ultraviolet, violet, biru dan hijau), sehingga hanya cahaya eksitasi dengan panjang gelombang tertentu yang melalui spesimen, sedangkan cahaya lainnya diserap. Ketika setiap zat disinari dengan cahaya eksitasi, ia memancarkan fluoresensi tampak dengan panjang gelombang lebih panjang dibandingkan cahaya yang diiradiasi dalam waktu yang sangat singkat. Fluoresensi memiliki kekhususan, umumnya lebih lemah daripada cahaya eksitasi, untuk dapat mengamati fluoresensi spesifik, lensa objektif di balik kebutuhan untuk menambahkan pemblokiran (atau penekanan) harus dipilih untuk digunakan.
Perbedaan mikroskop fluoresensi dan mikroskop biasa
1. Metode iluminasi biasanya jatuh, yaitu sumber cahaya diproyeksikan ke sampel melalui lensa objektif;
2. Sumber cahayanya adalah sinar ultraviolet, dengan panjang gelombang lebih pendek dan daya pisah lebih tinggi dibandingkan mikroskop biasa;
3. Terdapat dua filter khusus, filter di depan sumber cahaya digunakan untuk menyaring cahaya tampak, dan filter di antara lensa okuler dan lensa objektif digunakan untuk menyaring sinar ultraviolet untuk melindungi mata manusia.
Mikroskop fluoresensi juga merupakan sejenis mikroskop optik, perbedaan utamanya adalah panjang gelombang eksitasi keduanya berbeda. Ini menentukan struktur mikroskop fluoresensi dan mikroskop optik biasa serta penggunaan metode yang berbeda.
Mikroskop fluoresensi adalah alat dasar untuk sitokimia imunofluoresensi. Ini terdiri dari sumber cahaya, sistem pelat filter dan sistem optik dan komponen utama lainnya. Ia menggunakan panjang gelombang cahaya tertentu untuk merangsang spesimen memancarkan fluoresensi, yang diperbesar melalui lensa objektif dan sistem lensa okuler untuk mengamati gambar fluoresensi spesimen.
