Metode debugging dan langkah-langkah untuk mikroskop fase kontras
A. Berdasarkan penyesuaian sistem pencahayaan Kuhler, gunakan metode medan terang untuk memfokuskan sampel dengan jelas;
B. Putar lampu sorot ke Ph1 dan sejajarkan dengan garis skala pada meja putar. Pilih objektif kontras fase 10 x dan gantikan dengan sampel transparan yang akan diamati;
C. Lepaskan salah satu lensa mata, ganti dengan teleskop pemusatan, dan fokus pada dua cincin kontras di bidang pandang (cincin kontras hitam pada lensa objektif dan cincin kontras transmitansi pada lensa kondensor);
D. Dua cincin perbedaan dalam bidang pandang belum tentu bersamaan. Sesuaikan kedua alat penyetel pada lampu sorot (pengaturan posisi kiri dan kanan cincin pembeda dengan batang penyetel dan kenop tipe gesekan untuk mengatur posisi depan dan belakang), sehingga cincin transparan bergerak maju mundur bertepatan dengan cincin hitam. ;
e. Setelah penyesuaian, alihkan kembali ke lensa mata observasi dan tekan filter hijau ke jalur optik untuk mengamati gambar perbedaan fasa sampel;
F. Jika mengamati dengan lensa objektif 20 x dan 40 x maka lampu sorot sebaiknya diletakkan pada posisi Ph2, dan bila menggunakan lensa objektif 100 x maka lampu sorot sebaiknya ditempatkan pada posisi Ph3.
Lingkup aplikasi: Cocok untuk mengamati sampel transparan, tidak ternoda atau tidak ternoda, seperti berbagai sel, jaringan hidup, irisan jaringan tidak ternoda atau tidak ternoda, organisme akuatik, dll.
Prinsip dasar mikroskop kontras fase
Ketika cahaya melewati spesimen yang relatif transparan, tidak ada perubahan signifikan pada panjang gelombang (warna) dan amplitudo (kecerahan) cahaya. Oleh karena itu, ketika mengamati spesimen yang tidak diwarnai (seperti sel hidup) di bawah mikroskop optik biasa, morfologi dan struktur internalnya seringkali sulit dibedakan. Namun karena perbedaan indeks bias dan ketebalan bagian sel yang berbeda, akan terdapat perbedaan jalur optik cahaya langsung dan cahaya terdifraksi ketika melewati spesimen ini. Ketika jalur optik bertambah atau berkurang, fase gelombang cahaya yang dipercepat atau tertinggal akan berubah (mengakibatkan perbedaan fase). Perbedaan fasa cahaya tidak dapat dirasakan dengan mata telanjang, tetapi mikroskop perbedaan fasa dapat menggunakan perangkat khusus - bukaan melingkar dan pelat fasa, dan menggunakan fenomena interferensi cahaya untuk mengubah perbedaan fasa cahaya menjadi perbedaan amplitudo. (perbedaan terang dan gelap) yang dapat dideteksi oleh mata manusia. Hal ini membuat objek yang awalnya transparan menunjukkan perbedaan terang dan gelap yang jelas, meningkatkan kontras, dan memungkinkan kita mengamati dengan jelas sel hidup dan struktur halus tertentu di dalam sel yang tidak dapat dilihat atau dilihat dengan jelas di bawah mikroskop optik biasa dan mikroskop medan gelap.
Prinsip pencitraan mikroskop kontras fase: Sumber optik hanya dapat melewati cincin transparan dengan bukaan melingkar, yang kemudian difokuskan menjadi seberkas cahaya. Ketika berkas cahaya ini melewati benda yang diuji, ia mengalami derajat deviasi (difraksi) yang berbeda-beda karena perbedaan jalur optik setiap bagiannya. Karena bayangan yang dibentuk oleh cincin transparan bertepatan dengan permukaan konjugasi pelat fase dan bidang fokus di belakang lensa objektif. Oleh karena itu, cahaya langsung yang tidak menyimpang melewati permukaan konjugasi, sedangkan cahaya difraksi yang menyimpang melewati permukaan kompensasi. Karena perbedaan sifat permukaan konjugasi dan permukaan kompensasi pada pelat fase, keduanya akan menghasilkan perbedaan fase tertentu dan pengurangan intensitas cahaya yang melewati kedua bagian tersebut. Kedua rangkaian cahaya kemudian akan menyatu melalui lensa belakang dan berjalan pada jalur optik yang sama, menyebabkan interferensi antara cahaya langsung dan cahaya terdifraksi, mengubah perbedaan fasa menjadi perbedaan amplitudo. Dengan cara ini, selama mikroskop kontras fase, perbedaan fase yang tidak dapat dibedakan oleh mata manusia diubah menjadi perbedaan amplitudo (perbedaan kecerahan) yang dapat dibedakan oleh mata manusia melalui cahaya benda transparan yang tidak berwarna.
