Keuntungan dan Kerugian Mikroskop Pemindaian Laser Multifoton (MLSM)
Mikroskop pemindaian laser multifoton adalah metode eksperimental berdasarkan teknologi mikroskop pemindaian laser, yang memberikan kemampuan pemotongan optik yang lebih baik untuk observasi tiga dimensi. Metode eksitasi fluoresensi multi-foton menggunakan lampu merah dengan panjang gelombang panjang atau cahaya inframerah dekat untuk mengumpulkan gambar fluoresensi spesimen dengan resolusi tinggi, yang menyebabkan kerusakan minimal pada spesimen hidup. Oleh karena itu, cocok untuk pencitraan sel hidup, terutama jaringan hidup yang tebal seperti irisan otak, embrio, dll. Studi pencitraan seluruh organ atau bahkan seluruh tubuh.
Keuntungannya adalah sebagai berikut:
1. Gunakan lampu merah atau sinar inframerah untuk menggairahkan, dan hamburan cahayanya kecil (hamburan partikel kecil berbanding terbalik dengan pangkat empat panjang gelombang).
2. Tidak diperlukan lubang jarum, dan lebih banyak foton yang tersebar dari penampang pencitraan dapat dikumpulkan.
3. Lubang jarum tidak dapat membedakan foton tersebar yang dipancarkan dari area tidak fokus atau area fokus, dan rasio signal-to-noise dari pencitraan multi-foton di lapisan dalam baik.
4. Sinar ultraviolet atau cahaya tampak yang digunakan untuk eksitasi foton tunggal mudah diserap dan dilemahkan oleh sampel sebelum sinar mencapai bidang fokus, dan sulit untuk merangsang lapisan dalam.
5. Dalam pengamatan mikroskop biologi, pertimbangan pertama adalah tidak merusak keadaan aktif organisme itu sendiri dan menjaga aliran air, konsentrasi ion, oksigen dan nutrisi. Dalam hal pengamatan cahaya, baik energi panas maupun energi foton harus tetap berada dalam jumlah iradiasi dan energi cahaya agar sel tidak rusak.
6. Mikroskop multifoton juga memiliki banyak keunggulan. Misalnya, dalam hal resolusi tiga dimensi, penetrasi kedalaman, efisiensi hamburan, cahaya latar belakang, rasio signal-to-noise, kontrol, dll., terdapat karakteristik transenden yang tidak dimiliki atau tidak dapat ditandingi oleh mikroskop laser sebelumnya.
Mikroskopi pemindaian laser confocal multi-foton telah diperluas ke berbagai bidang penelitian dan aplikasi. Ia dapat melakukan observasi tiga dimensi non-destruktif terhadap sampel dalam keadaan aslinya, dan dapat meningkatkan resolusi dan rasio signal-to-noise sistem. Menggunakan bahan eksitasi multi-foton Perubahan properti juga dapat mewujudkan penyimpanan data ketinggian tiga dimensi dan pemesinan mikro tiga dimensi ke segala arah, yang memiliki nilai aplikasi tinggi. Dipercaya bahwa dengan perkembangan lebih lanjut dari mesin, bahan, teknologi laser, dll. terkait dengan mikroskop confocal multi-foton, lebih banyak mikroskop pemindaian laser confocal fotonik akan menerima pengembangan yang lebih besar dan penerapan yang lebih luas.
Kerugiannya adalah sebagai berikut:
1. Hanya dapat menggambarkan fluoresensi.
2. Jika sampel mengandung kromofor yang dapat menyerap cahaya eksitasi, seperti pigmen, sampel dapat rusak karena panas.
3. Resolusinya sedikit berkurang. Meskipun dapat diperbaiki dengan menggunakan lubang confocal secara bersamaan, akan ada kehilangan sinyal.
4. Dibatasi oleh laser ultracepat yang mahal, biaya mikroskop pemindaian multifoton relatif tinggi.
