Kelebihan dan Kekurangan Mikroskopi Pemindaian Laser Multiphoton
Mikroskop pemindaian laser multifoton adalah metode eksperimental yang didasarkan pada teknologi mikroskop pemindaian laser, yang memberikan kemampuan pemotongan optik yang lebih akurat dalam pengamatan tiga dimensi. Metode eksitasi fluoresensi multifoton menggunakan lampu merah panjang gelombang panjang atau cahaya inframerah dekat untuk mengumpulkan gambar spesimen fluoresensi beresolusi tinggi, yang memiliki kerusakan minimal pada spesimen hidup, sehingga cocok untuk pencitraan sel hidup, terutama untuk jaringan hidup yang tebal seperti irisan otak, embrio, Studi pencitraan seluruh organ atau bahkan seluruh organisme.
Keuntungannya adalah sebagai berikut:
1. Disebabkan oleh cahaya merah atau cahaya infra merah, hamburan cahayanya kecil (hamburan partikel kecil berbanding terbalik dengan pangkat empat panjang gelombang).
2. Tidak diperlukan lubang kecil, dan lebih banyak foton yang tersebar dari bagian pencitraan dapat dikumpulkan.
3. Lubang jarum tidak dapat membedakan foton tersebar yang dipancarkan dari area di luar fokus atau area fokus, dan rasio signal-to-noise dari pencitraan multi-foton di lapisan dalam bagus.
4. Sinar ultraviolet atau sinar tampak yang digunakan untuk eksitasi foton tunggal mudah diserap dan dilemahkan oleh sampel sebelum pancaran mencapai bidang fokus, dan tidak mudah untuk menggairahkan lapisan dalam.
5. Dalam hal pengamatan mikroskop biologi, pertimbangan pertama adalah tidak merusak keadaan aktif organisme itu sendiri, dan untuk menjaga sirkulasi air, konsentrasi ion, oksigen dan nutrisi. Dalam hal pengamatan cahaya, baik panas maupun energi foton harus tetap berada dalam jumlah iradiasi dan energi cahaya yang tidak merusak sel.
6. Mikroskop multifoton juga memiliki banyak keunggulan. Seperti resolusi tiga dimensi, penetrasi dalam, efisiensi hamburan, cahaya latar belakang, rasio signal-to-noise, kontrol, dll., ada karakteristik superior yang tidak dimiliki atau tidak dimiliki oleh mikroskop laser di masa lalu.
Mikroskopi pemindaian laser confocal multiphoton telah diperluas ke berbagai bidang penelitian dan aplikasi. Itu dapat melakukan pengamatan sampel non-destruktif tiga dimensi dalam keadaan alami, dan dapat meningkatkan resolusi dan rasio signal-to-noise dari sistem. Menggunakan bahan eksitasi multifoton Itu juga dapat mewujudkan penyimpanan data tinggi tiga dimensi dan mikrofabrikasi arah sewenang-wenang tiga dimensi, yang memiliki nilai aplikasi tinggi. Diyakini bahwa dengan pengembangan lebih lanjut dari mesin, bahan, dan teknologi laser yang terkait dengan mikroskop confocal multiphoton, akan ada lebih banyak mikroskop pemindaian laser confocal Photon yang akan mendapatkan pengembangan yang lebih besar dan aplikasi yang lebih luas.
Kerugiannya adalah sebagai berikut:
1. Hanya untuk pencitraan fluoresensi.
2. Jika sampel mengandung kromofor yang dapat menyerap cahaya eksitasi, seperti pigmen, sampel dapat rusak secara termal.
3. Resolusi sedikit berkurang. Meskipun dapat ditingkatkan dengan menggunakan bukaan confocal pada saat yang sama, sinyal akan hilang.
4. Karena keterbatasan laser ultrafast yang mahal, biaya mikroskop pemindaian multifoton relatif tinggi.
